詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠骨細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1319 |
商品介紹:
名稱 小鼠骨細胞 2.組織來源:骨組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠骨細胞分離自骨組織;骨組織的細胞成分包括骨原細胞、成骨細胞、骨細胞和破骨細胞。只有骨細胞存在于骨組織內,其他三種細胞均位于骨組織的邊緣。骨細胞(Osteocyte)是人體骨骼中最主要的細胞成分。在成年人骨骼中,骨細胞占細胞總數量的90%~95%,大約是成骨細胞數量的20倍。骨細胞生長在骨骼內部的骨基質中。骨細胞的細胞體呈梭形或類圓形,位于基質構成的骨陷窩內。與神經細胞類似,每個骨細胞具有大量向外延伸的突觸,而這些突觸均位于由骨基質構成的骨小管結構中。通過這些突觸,骨細胞能夠與骨表面的細胞、周圍其它的骨細胞進行“交流"。普遍認為,骨細胞起源于成骨細胞。在骨形成的終末階段,成骨細胞將可能有3種不同的歸宿:分化成為骨細胞、轉移至骨表面成為暫不活動的成骨細胞、進入程序死亡過程(凋亡)。骨細胞為扁橢圓形多突起的細胞,核亦扁圓、染色深。胞質弱嗜堿性。電鏡下,胞質內有少量溶酶體、線粒體和粗面內質網,高爾基復合體亦不發達。骨細胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內。相鄰骨細胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質中,骨細胞胞體所占據的橢圓形小腔,稱為骨陷窩,其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內均含有組織液,骨細胞從中獲得養分。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠骨細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠骨細胞經骨鈣素免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M217 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FAM3C / ILEI 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ICAM4 / CD242 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD3D & CD3E Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL1R1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CD4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CD80 / B7-1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL2RA 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠骨細胞硝酸銅,三水 99.99% metals basis3-乙酸 分析標準品,>99%Anti-Cygb/FITC 熒光素標記球蛋白抗體IgG
鉻酸銫 SP3-乙酸 用于植物培養,98%Anti-CYP450/FITC 熒光素標記色素P450單氧化抗體IgG
三氧化二鐵 SP3-酸 98%Anti-CYP1A1/FITC 熒光素標記色素P450 1A1抗體IgG
氧化釓 SP3-甲 96%Anti-CYP11A1/P450SCC/FITC 熒光素標記色素P450 11A1抗體IgG
99.99% metals basis-3-甲 97%Anti-CYP1A2/FITC 熒光素標記色素P450 1A2抗體IgG
鐵 SP3-乙 96%Anti-C ret/RET /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠指狀蛋白RET抗體IgG
氧化鑭 SP-2-羧酸 98%Anti-Phospho-Ret (Tyr905) /FITC 熒光素標記化指狀蛋白RET抗體IgG
氟化鋰 99.99% metals basis-3-羧酸 98%Anti-Phospho-Ret (Tyr1062)/FITC 熒光素標記化指狀蛋白RET抗體IgG