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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 臍帶血間充質干細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1183 |
商品介紹：
名稱 臍帶血間充質干細胞 2.組織來源：臍帶血 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 人臍帶血間充質干細胞分離自臍帶血；臍帶血是胎兒娩出、臍帶結扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發現，臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統的造血干細胞，可用于造血干細胞移植；因此，臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞，干細胞是生命的種子，它會分化成機體的各種細胞，結出各種不同的果實——血液細胞、神經細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量，又可進一步分化為各種組織細胞，從而在組織修復等方面發揮積極作用。間充質干細胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞。在不同的誘導條件下，可分化為多種造血細胞以外的組織細胞，并具有造血支持、免疫調節、組織修復等作用；目前，多用于風濕免疫疾病的治療。間充質干細胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細胞因子及生長因子，促進造血干細胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調節、抗炎和組織修復作用，可減輕移植物抗宿主病（GVHD）及其他移植相關并發癥。 5.方法簡介： 實驗室分離的人臍帶血間充質干細胞采用密度梯度離心法、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的人臍帶血間充質干細胞經CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H165 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 ALK-6 / BMPR-IB 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SELPLG 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 帶Myc標簽
ITLN2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IGSF21 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
WT1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
ACTA2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
MUC1 轉錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
LOXL4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
EGFL7 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
PRMT5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
臍帶血間充質干細胞異丁基鋰 1.6M 正己烷溶液2--3-甲基吡 95%Anti-Annexin I/FITC 熒光素標記人、大、小鼠膜粘連蛋白 I抗體IgG
（基硅烷）甲基化鋰 0.56 M in hexanes核黃素-5′-鈉鹽水合物 73-79%(HPLC)Anti-Annexin II/FITC 熒光素標記膜粘連蛋白-2抗體IgG
基鋁 2.0 M 甲苯溶液核黃素鈉 93%Anti-Annexin III /FITC 熒光素標記膜粘連蛋白 Ⅲ抗體IgG
3-溴苯甲酸 98%核黃素鈉 USP級Anti-Annexin IV /FITC 熒光素標記膜粘連蛋白 Ⅳ抗體IgG
2,5-二溴苯甲酸 96%鹽酸去氧素 98%Anti-Annexin V/FITC 熒光素標記重組膜粘連蛋白-5(人)抗體IgG
對氟苯甲酸 98%醋酸氯己定 98%Anti-Annexin VI/FITC 熒光素標記膜粘連蛋白 VI抗體IgG
對氟苯甲酸 99%,升華純化鹽酸洗必泰 96%Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 熒光素標記按蚊抗體IgG
3-氟苯甲酸 98%薯蕷皂素 分析標準品，>95%Anti-ANP/FITC 熒光素標記抗心鈉肽（心鈉素）抗體IgG
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