詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠外周血淋巴細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1401 |
商品介紹:
名稱 大鼠外周血淋巴細胞 2.組織來源:血液組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠外周血淋巴細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。淋巴細胞(lymphocyte)是白細胞的一種,是體積最小的白細胞。其由淋巴器官產生,主要存在于淋巴管中循環的淋巴液中,是機體免疫應答功能的重要細胞成分,是淋巴系統幾乎全部免疫功能的主要執行者,是對抗外界感染和監控體內細胞變異的一線“士兵"。淋巴細胞是一類具有免疫識別功能的細胞系,按其發生遷移、表面分子和功能的不同,可分為T淋巴細胞(又名T細胞)、B淋巴細胞(又名B細胞)和自然殺傷(NK)細胞。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞,它們的最初來源是相同的,都來自造血組織。T淋巴細胞隨血循環到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B細胞在骨髓中分化成熟。當受抗原刺激后,T淋巴細胞即轉化為淋巴母細胞,再分化為致敏T淋巴細胞,參與細胞免疫,其免疫功能主要是抗胞內感染、瘤細胞與異體細胞等;而B淋巴細胞是先轉化為漿母細胞,再分化為漿細胞,產生并分泌免疫球蛋白(抗體),參與體液免疫,其功能是產生抗體,提呈抗原,以及分泌細胞內因子參與免疫調節;NK細胞不依賴抗原刺激而自發地發揮細胞毒效應,具有殺傷靶細胞的作用。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠外周血淋巴細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠外周血淋巴細胞經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R310 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細胞形態圓形 傳代特性不增殖;不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
KIR2DL1 / CD158a 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Interferon alpha 10 / IFNA10 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Interferon alpha 7 / IFNA7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CRP / C-Reactive Protein 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 Pepsinogen C / PGC 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
AFP / alpha-fetoprotein 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 Tie2 / TEK 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 BCAM 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠外周血淋巴細胞四氫噻唑 98%乳糖,無水 Ph Eur,USP,NF,JPFAS/CD95(Human Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 人凋亡相關因子
苯基-三[二甲基硅氧烷]硅烷 98%硬脂酸鎂 AR,Mg 4.0-5.0%CD62E(Human E-Selectin) ELISA kit 人E選擇素
烯酸四酯 98%,含500ppm單甲MEHQ穩定劑硬脂酸鎂 USP,EPCCL1(Human Eotaxin 1) ELISA Kit 人嗜酸粒趨化蛋白
1,2-十四碳二 90%十二烷基鈉 Ph. Eur,USP級,92%ECF(Human eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit 人鼠嗜酸粒趨化因子
5-氯-1.3.3-基-2-亞甲基啉 98%葡聚糖10 分子量10000EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit 人腺來源的血管內皮生長因子
三辛 離子對試劑葡聚糖70 分子量 70000CNTF(Human Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 人睫狀神經營養因子
1,3,5-苯標準溶液 1mg/ml,基質:甲,用于水分析葡聚糖40 分子量40000CD30(Human Cluster of differentiation 30) ELISA Kit 人CD30分子
四丁基氫銨 離子對色譜葡聚糖5 分子量5000CXCR1(Human CXC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CXC趨化因子受體1