詳細介紹
公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
貨號 | GOY-01X0686 |
產品介紹:
名稱 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞 2.組織來源:肺組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞分離自肺組織;肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經多次反復分枝成無數細支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。小肺泡細胞,又稱I型肺泡細胞,厚約0.1微米,基底部是基底膜,無增殖能力。大肺泡細胞,又稱Ⅱ型肺泡細胞,分泌表面活性物質(二棕櫚酰),以降低肺泡表面張力。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間,數量較Ⅰ型肺泡細胞多,但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細胞核圓形,胞質著色淺、呈泡沫狀。電鏡下,細胞游離而有少量微絨毛,胞質內富含線粒體和溶酶體,有較發達的粗面內質網和高爾基復合體。核上方有較多的分泌顆粒,電子密度高、大小不等,直徑約0.1-1.0μm顆粒內含有平行排列的板層狀結構,稱為嗜餓性板層小體。小體內的主要成分為磷脂,以二棕櫚酰為主,此外還有糖胺多糖及蛋白質等。顆粒內物質釋放出來后,在肺泡表面形成一層粘液層,稱為表面活性物質(surfactant)。表面活性物質有降低肺泡表面張力、穩定肺泡大小的作用。呼氣時肺泡縮小,表面活性物質密度增加,表面張力降低,防止肺泡過度塌陷;吸氣時肺泡擴張,表面活性物質密度減小,肺泡回縮力加大,可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質的缺乏或變性均可引起肺不張,過度通氣可造成表面活性物質缺乏;吸入毒氣可直接破壞表面活性物質。Ⅱ型肺泡細胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能,故具有修復受損傷上皮的作用。 5.方法簡介: 普諾賽(Procell)實驗室分離的小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞采用彈性蛋白酶灌注消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 普諾賽(Procell)實驗室分離的小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞經SP-C免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M003 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞特點及處理:
產品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設備。 2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 | 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。 4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞培養技巧:
一、凍存時的注意事項: 1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。 4. 冷凍保存的細胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。
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小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞HBI乳酸菌生化鑒定條(GB) 英文名稱: 產品規格:5條/盒
0.78-50 ng/mL 溶血性鏈球菌A群(GAS)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
78-5000 pg/mL 漢坦病毒Ⅰ型(HTV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dexamethasone-induced Ras-related protein 1
MT培養基 英文名稱:MT,Medium 產品規格:250g
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抗生素檢定培養基6號 英文名稱:Antibiotic Agar NO.6 產品規格:250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Necdin
志賀氏菌增菌肉湯 英文名稱:Shigiella Broth 產品規格:250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dual specificity protein phosphatase 5
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。 1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。 3. 細胞傳代 1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養; 4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。 |