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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠骨髓單核細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1205 |
商品介紹：
名稱 小鼠骨髓單核細胞 2.組織來源：骨髓 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠骨髓單核細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網眼中，是一種海綿狀的組織，能產生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞，在骨髓細胞中約占0.04%，被認為是破骨細胞的前體細胞，較外周血單個核細胞誘導的破骨細胞得率高、全骨髓誘導法產生的破骨細胞數量多，純度高，較脾細胞誘導法分化效率高。骨髓單核細胞（BMMNCs）是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞，它屬干細胞類型。目前，大多數研究用淋巴細胞分離液分離提取骨髓單核細胞，最近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠骨髓單核細胞采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠骨髓單核細胞經CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M172 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態巨噬細胞樣 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Syndecan-2 / SDC2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FOXP2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
小鼠 CD40L / TNFSF5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
NGFR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
TFF1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
SULT2A1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SULT2B1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SULT1E1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
類呼吸道合胞病毒 hRSV (subtype A, strain Long) Fusion glycoprotein / RSV-F 基因全長ORF克隆 (密碼子優化) (表達載體), 帶FLAG標簽
PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
小鼠骨髓單核細胞小鼠甲基化Anti-SEPTIN14 Antibody高遷移率族蛋白B1檢測試劑盒
人抗肝膜抗體Anti-SEPHS2 Antibody高鐵血紅蛋白檢測試劑盒
大鼠血纖蛋白原降解產物Anti-SENP8 Antibody睪酮檢測試劑盒
小鼠抗增殖核抗原抗體Anti-SEPTIN1 Antibody弓形蟲IgG抗體檢測試劑盒
大鼠血栓調節蛋白Anti-SEPTIN2 Antibody弓形蟲IgM抗體檢測試劑盒
人抗肝特異性脂蛋白抗體Anti-SEPTIN3 Antibody鉤端螺旋體IgG抗體檢測試劑盒
人抗眼肌抗體Anti-SEPTIN3 Antibody鉤端螺旋體IgM抗體檢測試劑盒
大鼠血小板衍生生長因子Anti-SEPTIN7 Antibody孤啡肽檢測試劑盒x
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