化工儀器網
詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| HL-60 (原髓細胞白血病細胞) | 1×10?cells/T25培養瓶 | GOY-01X0109 |
商品介紹：
名稱 HL-60 (原髓細胞白血病細胞) 別稱HL 60; HL60 種屬人類 年齡（性別）女性，36歲 組織來源外周血；早幼粒細胞；急性粒－單核細胞白血病 生長特性懸浮細胞 細胞形態原粒細胞 背景描述HL-60細胞是一株早幼粒細胞；HL-60細胞源自一位患有急性粒-單核細胞白血病的36歲白人女性。HL-60細胞自發分化，丁酸鹽、佛波醇、肉豆蔻酸、DMSO(1%-1.5%)、放素D和視黃酸均可以促進分化。HL-60細胞表現出吞噬活性，并對趨化刺激有響應；HL-60細胞致癌基因myc表達陽性。 生物安全等級1 生長培養基IMDM＋20% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~28-40小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice (subcutaneous myeloid tumors). Yes, in semi-solid media. 受體表達情況complement, expressed; Fc, expressed 基因表達情況tumor necrosis factor (TNF), also known as tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha, TNF alpha), after stimulation with phorbol myristic acid, myc+ 注意事項該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液；請勿直接倒掉細胞培養液。 |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
乙胺碘呋酮(AD)免疫試劑盒進口、分裝
8-異構前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)免疫試劑盒進口、分裝
己糖激(HK)免疫試劑盒進口、組裝
類風濕因子(RF)抗體(IgA)免疫試劑盒*直銷
犬血栓調節蛋白(TM)免疫試劑盒*直銷
腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體免疫試劑盒進口、組裝
異質性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)免疫試劑盒進口、分裝
兔子環鳥苷(cGMP)免疫試劑盒進口、組裝
大鼠骨橋素(OPN)免疫試劑盒進口、分裝
山羊胞外超氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫試劑盒進口、分裝
HL-60 (原髓細胞白血病細胞) 西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 Simmons Citrate Agar 250g
5g N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 Acetyl-D-Glucosamine ?20℃保存
250mL TE Buffer,20X,pH7.6 TE Buffer,20X,pH7.6 常溫保存
50mL DEAE交換介質 DEAE Medium 常溫干燥封袋保存
2 ug pSV-beta-galactosidase pSV-beta-galactosidase 低溫運輸，-20℃保存
100mL RNase-free 鹽酸胍溶液,8M 常溫
2 ug pCSN44 pCSN44 低溫運輸，-20℃保存
化工儀器網