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腦成纖維細胞

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更新時間:2022-04-22 09:00:37瀏覽次數:238

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?Cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X1079 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
腦成纖維細胞的相關*:血液輔A含量比色法定量檢測試劑盒 20次
細胞輔Q含量比色法定量檢測試劑盒 20次
組織輔Q含量比色法定量檢測試劑盒 20次
血液輔Q含量比色法定量檢測試劑盒 20次
體液輔Q含量比色法定量檢測試劑盒 20次
植物輔Q含量比色法定量檢測試劑盒 20次

詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

腦成纖維細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1079

商品介紹:

名稱    腦成纖維細胞 

2.組織來源:腦組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

腦成纖維細胞分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡介:

實驗室分離的人腦成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的人腦成纖維細胞Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-H125

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

甲型流感 H3N2 (Aichi/2/1968) 神經 (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

甲型流感 H1N1 (USSR/90/1977) 神經 (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

甲型流感 H1N1 (Puerto Rico/8/1934) 神經 (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

甲型流感 H15N2 (Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

乙型流感 (Massachusetts/03/2010) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

甲型流感 H14N5 (Mallard/Astrakhan(Gurjev)/263/1982) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

甲型流感 H11N6 (duck/England/1/1956) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

甲型流感 H9N8 (chicken/Korea/164/04) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

甲型流感 H9N2 (Hong Kong/35820/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

甲型流感 H7N8 (mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

腦成纖維細胞纖維二糖-E(CC)瓊脂 英文名稱:Cellobiose-polymyxin E Agar 產品規格:250g

15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Thromboxane B2

78-5000 pg/mL 人ADP/ATP轉位2 ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mL 人白介素1家族成員9(IL1F9)ELISA試劑盒

溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養基(2015藥典) 英文名稱:Getrimide Agar 產品規格:250g

溶菌營養肉湯 英文名稱:Lysozyme Nutrient Broth 產品規格:250g

3%NaClONPG 英文名稱: 產品規格:20支

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Insulin-like growth factor-binding protein 7

腦心浸液肉湯 英文名稱:Brain Heart Infusion Broth 產品規格:250g

0.156-10 ng/mL 人白介素1受體拮抗劑(IL1Ra/CD121)ELISA試劑盒

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