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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 豬前脂肪細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0693 |
商品介紹：
名稱 豬前脂肪細胞 2.組織來源：脂肪組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 豬前脂肪細胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成，聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸，經血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內皮功能、纖溶活動及炎癥反應，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內分泌系統。脂肪組織在體內含有兩種主要的細胞：一種是在胞漿內積聚脂滴的成熟脂肪細胞；另一種是雖未在胞漿內積聚脂滴但有這種潛能的前脂肪細胞。前脂肪細胞呈梭形，有分裂和增殖的能力；成熟的脂肪細胞呈圓形，已經失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪細胞是一類具有增殖和向脂肪細胞分化能力的特異化前體細胞，與肥胖有著非常密切的關系。前脂肪細胞是一種類成纖維細胞，在演變的過程中不斷吸收脂質，最終成為成熟的脂肪細胞。前脂肪細胞對外界機械損傷的抵抗力較強，可望成為軟組織缺損的有益填充物。 5.方法簡介： 實驗室分離的豬前脂肪細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的豬前脂肪細胞經油紅O染色檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-P004 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
HAX1 基因全長ORF克隆
TPST2 基因全長ORF克隆
TPST1 基因全長ORF克隆
PRDX6 基因全長ORF克隆
PRDX3 基因全長ORF克隆
PRDX2 基因全長ORF克隆
FCRL3 基因全長ORF克隆
BTF3 基因全長ORF克隆
TGFA 基因全長ORF克隆
CD3G 基因全長ORF克隆
豬前脂肪細胞15.6-1000 pg/mL 登革熱病毒Ⅰ型(DFV-Ⅰ)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
HBI阪崎腸桿菌生化鑒定條(GB) 英文名稱： 產品規格：5條/盒
0.156-10 ng/mL 人睫狀神經營養因子(CNTF)ELISA試劑盒
無機磷細菌培養基 英文名稱：Inorganic phosphorus bacteria 產品規格：250g
7.8-500 pg/mL 人Klotho蛋白(KL)ELISA試劑盒
EG培養基 英文名稱：EG Medium 產品規格：250g
VRB-MUG瓊脂 英文名稱： 產品規格：100g
0.312-20 ng/mL 轉基因植物Bar基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
茜素-β-半乳糖苷肉湯（Aliz-gal肉湯） 英文名稱：Aliz-gal Broth 產品規格：100g
9.375-600 pg/mL ELISA Kit for Human Fatty acid-binding protein, adipocyte
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