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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠腎足突細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0933 |
商品介紹：
名稱 小鼠腎足突細胞 2.組織來源：腎組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠腎足突細胞分離自腎組織；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。足細胞（podocyte）即腎小囊臟層上皮細胞，它附著于腎小球基底膜（GBM）的外側，連同GBM和毛細血管內皮一起構成了腎小球血液濾過屏障。足細胞特殊的解剖位置，使得其體內研究較為困難；又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞，體外培養的原代細胞不能增殖。足細胞呈星型多突狀，胞體較大，由胞體伸出許多突起，又稱足突（FP），呈指狀交叉復蓋于GBM外表面，并通過黏附分子和蛋白多糖分子與GBM相連。足細胞在正常情況下可以分泌GBM的主要組成成分，IV型膠原和纖維連接蛋白（FN）；在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解GBM作用的基質金屬蛋白酶（MMPs）和組織蛋白酶，從而在GBM的代謝平衡中發揮重要作用。足細胞之間鄰近的足突相互交替，形成了許多30-40nm的裂孔，孔上覆蓋一層厚4-6nm的裂孔隔膜，即腎小球足突間裂孔隔膜。后者是血漿蛋白通過脈管系統的最后屏障，對于維持腎小球濾過屏障結構與功能完整性發揮關鍵作用。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠腎足突細胞采用機械研磨過不同孔徑不銹鋼網篩結合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠腎足突細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M067 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 MYOT 基因全長ORF克隆
大鼠 PTBP1 基因全長ORF克隆
大鼠 YWHAZ 基因全長ORF克隆
大鼠 CPXM1 基因全長ORF克隆
大鼠 NCSTN 基因全長ORF克隆
大鼠 SC5D 基因全長ORF克隆
大鼠 NUCB1 基因全長ORF克隆
大鼠 CAPN6 基因全長ORF克隆
大鼠 DDX18 基因全長ORF克隆
大鼠 HSP90AB1 基因全長ORF克隆
小鼠腎足突細胞3%NaCl 英文名稱： 產品規格：20支
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Gastrokine-2
1.56-100 ng/mL 人基礎免疫球蛋白(Basigin)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Propionyl-CoA carboxylase beta chain, mitochondrial
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Gamma-secretase subunit PEN-2
固氮菌用阿須貝氏培養基 英文名稱：Nitrogen-fixing bacteria with the A Sugai’s medium 產品規格：250g
增菌肉湯培養基E 英文名稱：Enrichmentbroth medium E 產品規格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Macrophage mannose receptor 1
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Vigilin
大腸桿菌／大腸菌群顯色培養基(第二代) 英文名稱：E.Coli/Coliform Chromogenic Medium 產品規格：1000(ML)
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