詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠小腸隱窩上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0831 |
商品介紹:
名稱 大鼠小腸隱窩上皮細胞 2.組織來源:小腸組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠小腸隱窩上皮細胞分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環行皺襞從幽門附近開始出現,在十二指腸末段和空腸頭段極發達,向下逐漸減少和變矮,至腸中段以下基本消失。粘膜表面還有許多細小的腸絨毛,是由上皮和固有層向腸腔突起而成,形狀不一,以十二指腸和空腸頭段。絨毛于十二指腸呈葉狀,于空腸呈指狀,于回腸則細而短。環行皺襞和絨毛使小腸表面積擴大20-30倍,絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺,又稱腸隱窩,故小腸腺與絨毛的上皮是連續的,小腸腺直接開口于腸腔。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠小腸隱窩上皮細胞采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠小腸隱窩上皮細胞經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R037 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 Smad3 基因全長ORF克隆
小鼠 CPM 基因全長ORF克隆
小鼠 GPC3 基因全長ORF克隆
小鼠 ART1 基因全長ORF克隆
小鼠 DPP10 基因全長ORF克隆
小鼠 S100B 基因全長ORF克隆
小鼠 CDH6 / KCAD 基因全長ORF克隆
小鼠 WIF1 基因全長ORF克隆
小鼠 CD300E 基因全長ORF克隆
小鼠 LIGHT / TNFSF14 基因全長ORF克隆
大鼠小腸隱窩上皮細胞15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein A-IV
0.312-20 ng/mL 人白細胞抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒
氧化試劑 英文名稱: 產品規格:1g
15.6-1000 pg/mL 人白介素17B(IL-17B)ELISA試劑盒
營養瓊脂(NA)顆粒 英文名稱:Nutrient Agar 產品規格:250g
濾膜腸球菌瓊脂 英文名稱:Filter Membrane Enterococcus Agar 產品規格:250g
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Carbohydrate Antigen 50
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Intercellular adhesion molecule 1
1.56-100 nmol/L ELISA Kit for Human Des-gamma carboxyprothrombin
0.312-20 ng/mL 三腺苷(Adenosine triphosphate)ELISA試劑盒