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詳細介紹
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 大鼠心臟微血管周細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1325 |
商品介紹：
名稱 大鼠心臟微血管周細胞 2.組織來源：心臟組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠心臟微血管周細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養物質，并帶走代謝的終產物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明，心肌微血管周細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠心臟微血管周細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠心臟微血管周細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R220 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳3-5代左右；3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 SIRP alpha / CD172a 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CLEC4D / CLECSF8 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
雪貂 IFNG / Interferon Gamma 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 GM-CSF / CSF2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠心臟微血管周細胞Alexa Fluor 488標記的羊抗兔IgGAnti-SCRIB Antibody鹽酸小檗6078-17-7價格
Alexa Fluor 350標記的羊抗小鼠IgGAnti-SCRIB Antibodyγ-蟾蜍它465-11-2說明書
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PE-CY5標記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC1 Antibody尿苷58-96-8品牌
PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC3 Antibodycroverin76475-17-7說明書
Cy3標記的羊抗小鼠IgGAnti-SDC4 Antibody(原貨號PB0464)n-feruloyloctopamine66648-44-0品牌
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