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CA46 (Burkitt's淋巴瘤細胞)

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更新時間:2022-04-02 15:30:12瀏覽次數:341

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 1×10?cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X0049 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
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詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

CA46 (Burkitt's淋巴瘤細胞)

1×10?cells/T25培養瓶

GOY-01X0049

商品介紹:

名稱    CA46 (Burkitt's淋巴瘤細胞)  

別稱CA-46; CA 46

種屬人類

年齡(性別)不詳

組織來源腹水液

生長特性懸浮細胞

細胞形態淋巴母細胞樣

背景描述CA46細胞源于Burkitt's淋巴瘤病人的腹水液,是Magrath建立的系列淋巴瘤細胞系之一。CA46細胞EBV核抗原(EBNA)陰性,表達表面IgM和分泌不能與A蛋白結合的IgM12%的群體細胞表達補體受體,但不表達Fc受體。CA46細胞生長的群體倍增時間是16小時,具較快的生長速度。?

生物安全等級1

生長培養基RPMI-164020% FBS1% P/S

推薦傳代比例2-3×10^5cells/mL

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~16-36小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

受體表達情況complement

抗原表達情況HLA B27 (the patient was HLA A2, A11, B17, B27)

基因表達情況immunoglobulin (surface and secreted)

注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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CA46 (Burkitt's淋巴瘤細胞) 100µL 小鼠抗GST標簽單抗 Anti GST-Tag Mouse MAb -20℃保存

2 ug PT2/mCherry PT2/mCherry 低溫運輸,-20℃保存

200U AMV逆轉錄 AMV Reverse Transcriptase -20℃保存

2 ug pCYB 3 pCYB 3 低溫運輸,-20℃保存

B(1.2mg) Polymyxin B 1.2mg/支*5

25mg 核糖核酸 A,牛胰 RNase A,Bovine Pancreas  室溫干燥保存

50T 土拉桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

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