化工儀器網
詳細介紹
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 大鼠視乳頭星形膠質細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1137 |
商品介紹：
名稱 大鼠視乳頭星形膠質細胞 2.組織來源：眼球 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠視乳頭星形膠質細胞分離自視神經乳頭；視乳頭位于黃斑區鼻側附近，境界清楚，呈白色、圓盤狀，因此也稱為視盤。視網膜上視覺纖維在此匯集，并于此穿出眼球向視中樞傳遞。視乳頭中央有一小凹陷區，稱為視杯或生理凹陷。視乳頭是視神經纖維聚合組成視神經的起始端，它沒有視細胞，因而沒有視覺，在視野中是生理盲點。視乳頭是開角型青光眼最早受損的部位，星形膠質細胞是視神經乳頭處主要的膠質細胞類型，可為視網膜神經節細胞無髓鞘的軸突提供結構和生物支持。胞軸突喪失并伴有視乳頭處細胞外基質重坦為主要特征。導致視網膜神經節細胞喪失的病理生理機制尚未*闡明，神經膠質細胞對調控神經元微環境起多重作用，越來越多的證據表明膠質細胞町能對神經系統發育、損傷、修復及再生起極為關鍵的作用。視乳頭星形膠質細胞胞體多扁平，體積較大，形狀多呈不規則的多邊形，突起較粗，胞核為橢圓形，核仁清晰可見，核周有較密集物質，胞質稀疏，骨架結構良好，明顯不同于長梭形的成纖維細胞形態。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠視乳頭星形膠質細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法、結合差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠視乳頭星形膠質細胞經GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R146 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
CSNK1G2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
PRSS23 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FEN1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
USP18 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CTSH 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
WDR5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CAPN3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
C1QC 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
METTL7A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
LYPLA2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
大鼠視乳頭星形膠質細胞1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-secretase 1
7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Cholesterol
蛋白胨（250g） 英文名稱：Peptone 產品規格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Zinc finger protein SNAI2
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Neprilysin
KF鏈球菌瓊脂 英文名稱：KF Streptococcus Agar 產品規格：100
1.56-100 ng/mL 人核糖核酸7(RNase 7)ELISA試劑盒
碘液 英文名稱： 產品規格：2ml*20支
0.312-20 ng/mL 人驅動蛋白家族成員5A(KIF5A)ELISA試劑盒
化工儀器網