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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 大鼠子宮平滑肌細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0887 |
商品介紹：
名稱 大鼠子宮平滑肌細胞 2.組織來源：子宮組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠子宮平滑肌細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持，這些結構受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚，由成束或成片的平滑肌組成，肌束間以結締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能，收縮受激素的調節，其收縮活動有助于向輸卵管運送、經血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管，如果平滑肌層細胞過度生長，勢必造成血管壁的增厚，管腔堵塞，體外培養平滑肌細胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機制。子宮平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。子宮平滑肌細胞的主要功能：①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態，在孕期能的擴張子宮容積，保證胎兒孕育環境；②平滑肌細胞有收縮舒張能力，在時能形成生理性的縮腹環，推動胎兒向下移動，輔助。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠子宮平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠子宮平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R052 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 ITK Kinase 基因全長ORF克隆
小鼠 ANGPTL6 基因全長ORF克隆
小鼠 ITGB2 基因全長ORF克隆
小鼠 CCL9 基因全長ORF克隆
小鼠 Angiopoietin-like4 基因全長ORF克隆
小鼠 ITGB7 基因全長ORF克隆
小鼠 CXCL5 基因全長ORF克隆
小鼠 BAFFR / TNFRSF13C 基因全長ORF克隆
小鼠 BAFF / TNFSF13B 基因全長ORF克隆
小鼠 BID 基因全長ORF克隆
大鼠子宮平滑肌細胞0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human HLA class I histocompatibility antigen, alpha chain E
纖維素剛果紅培養基 英文名稱：Cellulose Cong Red Medium 產品規格：250g
含100ml 緩沖蛋白胨水（BPW）均質袋 英文名稱：Buffered Peptone Water 產品規格：90ml/袋*10
Amies運送培養基管 英文名稱：Amies Transport Medium 產品規格：20支/包
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human PDZ and LIM domain protein 1
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human 3-hydroxyanthranilate 3, 4-dioxygenase
31.2-2000 pg/mL 人前列腺酸性(PAP/PSAP)ELISA試劑盒
胰蛋白胨酵母膏葡萄糖肉湯 英文名稱：Tryptone-Yeast Extract-Glucose Broth 產品規格：250g
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Glycylpeptide N-tetradecanoyltransferase 1
0.078-5 ng/mL 人白細胞介素24(IL-24)ELISA試劑盒
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