Thy1 Thy1細(xì)胞表面抗原ELISA實驗原理正在出售的產(chǎn)品：1mg 羧肽 Y( 酵母 ) Carboxypeptidase Y -20℃保存2 ug pET-43.1a(+) pET-43.1a(+) 低溫運輸，-20℃保存金氏B培養(yǎng)基 King’s B medium 250g1瓶 A549細(xì)胞株 A549 低溫運輸和保存1套 玻璃勻漿器,10 mL Glass Homogenizer 常溫保

試劑配制：

1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。

2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3、樣品（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4、標(biāo)記抗體（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6、標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水25倍。

10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

注：本公司提供試劑盒免費代測服務(wù)。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員。

產(chǎn)品全稱：Thy1 Thy1細(xì)胞表面抗原ELISA實驗原理

英文名稱：Thy1 Cell Surface Antigen(Thy1)ELISA Kit

貨號：GOY-01E12921

規(guī)格：48T/96T

服務(wù)：可提供免費代測服務(wù)，以及產(chǎn)品說明書和技術(shù)指導(dǎo)等

保存環(huán)境：2-8℃低溫、避光、防潮

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。

檢測目的：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供。

具有如下優(yōu)點：

一、高效、靈敏、特異的抗體；

　　二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；

　　三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

　　四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；

　　五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。

試劑和樣本的控制方法：

操作步驟：

1、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。

3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板，固定于框架上，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本40μL(即樣本5倍)；空白對照孔不加。

4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說明書操作洗板)。

6、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對照孔不加。

7、溫育：重復(fù)4的操作。

8、洗板：重復(fù)5的操作。

9、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL，37℃避光顯色15min。

10、終止：取出酶標(biāo)板，每孔加終止液50μL，終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11、測定：以空白孔調(diào)零，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

12、計算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值，計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程，再根據(jù)樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以倍數(shù)。

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