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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠下丘腦神經元細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1381 |
商品介紹：
名稱 小鼠下丘腦神經元細胞 2.組織來源：腦組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠下丘腦神經元細胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調節內臟活動和內分泌活動的較高級神經中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部（又名視前區和視上區）﹑中部（結節區）和后部（乳頭體區）。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與中樞神經系統的其它部位具有密切的相互聯系。它不僅通過神經和血管途徑調節腦垂體前﹑后葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與調節自主神經系統﹐如控制水鹽代謝﹑調節體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內臟活動以及情緒等。下丘腦神經元與來自其他部位的神經纖維有廣泛的突觸聯系，可以接受很多神經沖動，為內分泌系統和神經系統的中心。它們能調節垂體前葉功能，合成神經垂體激素及控制自主神經和植物神經功能。故提取下丘腦神經元進行體外培養，建立下丘腦神經元體外實驗平臺具有重要意義。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠下丘腦神經元細胞采用胰蛋白酶消化法結合神經元專用培養基培養、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠下丘腦神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M242 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態神經元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
ERP27 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IZUMO4 / C19orf36 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IFI30 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD1B / CD1A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SIGLEC5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
AGER / RAGE 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NRG1-beta 1 (ECD) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ENPP5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ANGPTL4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠下丘腦神經元細胞(R)-4-苯基-2-惡唑烷酮 98%2-二苯甲酮 98%Anti-PRL 泌乳素抗體
L-苯氨 98%2-溴苯乙酮 98%Anti-PRL1/PTP4A1 肝再生酯1抗體
L-苯甘氨 98%3-溴代苯乙酮 98%Anti-PRL2/PTP4A2 肝再生酯2抗體
(S)-4-苯基-2-惡唑烷酮 98%2-氯代苯乙酮 98%(劇品)Anti-PRL3/PTP4A3 酯3蛋白抗體
D-苯甘氨 99%2,4-二羥基苯乙酮 99%Anti-prox-1 prox-1抗體
D-脯氨 98%3'-羥基苯乙酮 98%Anti-PH-4/P4H-TM 脯水解4抗體
L-纈氨 97%4-羥基二苯甲酮 98%Anti-PHD3 脯羥化抗體
D-纈氨 98%2,4,6-三羥基苯乙酮 一水合物 98%Anti-PHD2 脯羥化2抗體
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