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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠胰島β細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1277 |
商品介紹：
名稱 小鼠胰島β細胞 2.組織來源：胰腺組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠胰島β細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌生長抑素，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細胞，即胰島B細胞，是胰島細胞的一種，屬內分泌細胞的一種，能分泌胰島素，與胰島α細胞分泌的胰高血糖素一起起到調節血糖的作用。胰島B細胞功能受損、胰島素分泌絕對或相對不足（胰島素抵抗），會使血糖升高，從而引發糖尿病。而胰島B細胞癌變會生成胰島素瘤，引起惡性血糖降低癥狀。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠胰島β細胞采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用胰酶逐級消化胰島制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠胰島β細胞經Insulin含量檢測，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M200 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 AARS / alanyl-tRNA synthetase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 VEGF164 / VEGFA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SerpinB4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
PARP-3 / PARP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
TH / Tyrosine Hydroxylase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
TERF1 / TRF1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 THOP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SLPI 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠胰島β細胞無水鈉 CP,98%鋅標準溶液 100μg/mlAnti-arfaptin 2(phospho S260) /FITC 熒光素標記化ADP核糖基化因子結合蛋白2抗體IgG
無水鈉 SP鋯標準溶液 1000μg/mlAnti-ARHI/FITC 熒光素標記ARHI蛋白抗體IgG
標準溶液 0.2500mol/L(0.5N)烯 CP,98.0%（劇品）Anti-ARIP2a/FITC 熒光素標記激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體IgG
無水鈉 99.99% metals basis烯 AR,99.0% （劇品）Anti-ARIP2B/FITC 熒光素標記激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b抗體IgG
標準溶液 0.05000mol/L(0.1N)烯 分析標準品（劇品）Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標記芳香化蛋白抗體IgG
無水鈉 ACS, ≥99.0%莰烯 分析標準品Anti-Aromatase P450/FITC 熒光素標記芳香化/色素P450/P450抗體IgG
無水鈉 農殘級莰烯 75%Anti-ART/FITC 熒光素標記膠質系源性神經營養因子GDNF的一種抗體IgG
無水鈉 for HPLC，≥99.0% (T)莰烯 95%Anti-ASCL1/MASH1 /FITC 熒光素標記神經母特異性轉移因子抗體IgG
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