詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠嗅球細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1415 |
商品介紹:
名稱 大鼠嗅球細胞 2.組織來源:嗅球組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠嗅球細胞分離自嗅球組織;嗅球是脊椎動物前腦結構中參與嗅覺的部分,用于感知氣味。嗅球分為二個不同的結構:主嗅球及輔助嗅球。在大腦額葉來自許多嗅細胞的神經纖維纏集在一起,形成線球狀的部分。在這里,纖維與多個次級神經元——僧帽細胞的樹突相連接,進而由這里伸出神經纖維形成嗅囊,終止于額葉下方。一般認為它在嗅味的辨別中具有重要的功能。對于大部份的脊椎動物而言,嗅球位在大腦的最前面,不過人的嗅球位于大腦的內部。嗅球由篩骨的篩板固定且保護嗅球,哺乳動物的篩板會分隔嗅球和嗅上皮,而嗅神經會穿過篩板中的篩孔而連接到嗅球。嗅球分為二個不同的結構:主嗅球及輔助嗅球。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠嗅球細胞采用消化法結合神經元專用培養基培養、化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠嗅球細胞經MAP-2免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml) 培養基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R317 換液頻率每2天半量換液1次 生長特性貼壁 細胞形態神經元細胞樣 傳代特性不傳代,不增值,存活1-2周 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 AGT / SerpinA8 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 NTRK2 / TrkB 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H5N2 (A/ostrich/South Africa/AI1091/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CD83 / HB15 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 FCER2A / CD23 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
雪貂 CD20 / MS4A-1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
F9 / FIX / Factor IX 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FST / Follistatin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠嗅球細胞Bacillus sp.酚檢測試劑盒
Bacillus sp.對甲酚檢測試劑盒
Bacillus sp.酮檢測試劑盒
Bacillus sp.網鈣蛋白3檢測試劑盒
Bacillus sp.髓磷脂轉錄因子1檢測試劑盒
Bacillus sp.檢查點蛋白激1檢測試劑盒
Bacillus sp.超敏肌鈣蛋白T檢測試劑盒
Bacillus sp.沉默調節蛋白3檢測試劑盒