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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠神經星形膠質細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1165 |
商品介紹：
名稱 小鼠神經星形膠質細胞 2.組織來源：腦組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠神經星形膠質細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經星形膠質細胞，是哺乳動物腦內分布*泛的一類細胞，也是膠質細胞中體積最大的一種。用經典的金屬浸鍍技術（銀染色）顯示此類膠質細胞呈星形，從胞體發出許多長而分支的突起，伸展充填在神經細胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔神經細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足，有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上，因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足，靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內表面，彼此連接構成膠質界膜。細胞剛分離時呈圓形，24h后大部分細胞貼壁，均勻分布于瓶底，部分細胞伸出細小突起，培養4-5d后細胞數量明顯增多，呈扁平、多角形，胞質豐富且核漿較少，細胞核呈橢圓形，偏于胞體一側。神經星形膠質細胞是中樞神經系統的重要細胞組成，不僅具有支持功能，還能夠合成及分泌多種神經活性物質，在維持神經元內外環境、生存、遷移、免疫調節、信號轉導、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠神經星形膠質細胞采用酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠神經星形膠質細胞經GFAP免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M157 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
glypican 4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
小鼠 RIPK3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
小鼠 CYR61 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
NMU 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
JAG1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
TLR6 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CXCR4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CTLA4 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
Smad3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CXCL9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
小鼠神經星形膠質細胞GADD153抗體Human RFNG (Beta-1,3-N-acetylglucosaminyltransferase radical fringe) ELISA KIT人胃蛋白（PP）ELISA試劑盒,
中間絲蛋白β-synemin抗體Human SASH1(SAM and SH3 domain-containing protein 1) ELISA Kit人糖化血紅蛋白A1c（A1c）ELISA試劑盒,
MAP激激活死亡域蛋白4C抗體Human SASH3 (SAM and SH3 domain-containing protein 3) ELISA KIT人雷帕霉素靶蛋白（mTOR）ELISA試劑盒,
橋粒糖蛋白4抗體Human RHO (Rhodopsin) ELISA KIT小鼠上皮中性粒活化肽78（ENA-78/CXCL5）ELISA試劑盒,
動力蛋白3抗體Human RBPMS2 (RNA-binding protein with multiple splicing 2) ELISA KITRVS 肉湯
δ連環蛋白/δ連環素/δ鏈接素（δ-catenin）抗體Human SERGEF (Secretion-regulating guanine nucleotide exchange factor) ELISA KIT1 0%NaCl胰胨水
胞漿接頭蛋白Dok6抗體Human SELPLG (P-selectin glycoprotein ligand 1) ELISA KITα-淀粉（枯草桿）
胞漿接頭蛋白Dok5抗體Human ALOX15B(Arachidonate 15-lipoxygenase B) ELISA Kit8-甲氧基補骨脂素 8-Methoxypsoralen
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