詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠腦微血管內皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1031 |
商品介紹:
名稱 大鼠腦微血管內皮細胞 2.組織來源:腦組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠腦微血管內皮細胞分離自腦組織;腦微血管內皮細胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,能夠限制可溶性物質和細胞等從血液進入大腦,大腦微血管內皮細胞與外周內皮細胞相比具有一些相同特性。它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。與外周內皮細胞相同,大腦微血管內皮細胞表面表達細胞粘附分子,調控白細胞進入大腦。由于微血管內皮細胞的器官特異性,內皮細胞通常取源于疾病研究的相關組織。其主要特征如下:①腦微血管內皮細胞存在許多細胞間緊密連接,產生很高的跨內皮阻抗,延遲細胞旁的通量;②腦微血管內皮細胞缺乏內皮細胞的窗孔結構,其液相物質胞飲水平較低;③腦微血管內皮細胞具有不對稱定位酶和載體介導轉運系統,從而產生“兩極分化"的表現型。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠腦微血管內皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠腦微血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R108 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態內皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 IFITM1 基因全長ORF克隆
大鼠 GGT1 基因全長ORF克隆
大鼠 MSR1 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR8 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR7 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR6 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR5 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR4 基因全長ORF克隆
大鼠 CCR1 基因全長ORF克隆
大鼠 CD164 基因全長ORF克隆
大鼠腦微血管內皮細胞0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DNA topoisomerase 2-beta
蔗糖胰蛋白胨肉湯 英文名稱:Sucrose Tryptone Broth 產品規格:200
0.156-10 ng/mL 人細胞角蛋白19(KRT-19)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Matrix metalloproteinase-17
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein delta homolog 1
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Leptin receptor
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Serine--pyruvate aminotransferase
0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Metalloreductase STEAP1
0.312-20 ng/mL 人血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Beta-klotho