詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠卵泡膜細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1291 |
商品介紹:
名稱 小鼠卵泡膜細胞 2.組織來源:卵巢組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠卵泡膜細胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和神經。哺乳動物的卵巢內卵泡的發育需要相關激素的調節才能完成,垂體促性腺激素(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發育,其過程中還產生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體促性腺激素的作用下協同合成的,卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞,并轉變為雌激素。因此,卵泡膜細胞在生殖內分泌調節中占有關鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性激素有關的婦產科疾病(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發育的過程中,卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結構的完整性,參與構成卵母細胞和顆粒細胞發育的微環境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調節膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關報道,但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠卵泡膜細胞采用先機械分離后膠原酶消化結合Percoll密度梯度離心法、并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠卵泡膜細胞經3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M205 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
GBA3 / CBGL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CSNK1G1 / CKI-gamma 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
EGFR / HER1 / ErbB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CDK4 / CMM3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 SerpinB8 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ALOX5AP / FLAP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
LTC4S / LTC4 synthase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ATL1 / SPG3A / Atlastin-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CDC2 Kinase / CDK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠卵泡膜細胞Bacillus cereus酯檢測試劑盒
Bacillus cereus谷脫羧檢測試劑盒
Bacillus cereusγ丁酸檢測試劑盒
Bacillus cereusγ-丁酸轉氨檢測試劑盒
Bacillus thuringiensisI型膠原蛋白檢測試劑盒
Bacillus thuringiensis4-丁酸轉氨檢測試劑盒
Bacillus cereusα檢測試劑盒
Bacillus cereus油菜甾檢測試劑盒