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詳細介紹
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 大鼠胃平滑肌細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1301 |
商品介紹：
名稱 大鼠胃平滑肌細胞 2.組織來源：胃組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠胃平滑肌細胞分離自胃組織；胃柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構成。粘膜上皮為柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構成大量腺體（胃底腺、賁門腺、幽門腺），它們的分泌物混合形成胃液，對食物進行化學性消化。粘膜在幽門處由于覆蓋幽門括約肌的表面而形成環狀的皺襞叫幽門瓣。胃肌膜由三層平滑肌構成，外層縱形，中層環形，內層斜行，其中環形肌，在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細胞源自胃的平滑肌層，細胞通過緊密連接，進行同步性運動，完成肌肉的舒縮活動，以推動食物前進，完成對食物的機械性消化，并促進化學性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性，如興奮、自律性、傳導性和收縮性，在離體后，置于適宜的環境內，仍能進行良好的節律性運動，但其收縮很緩慢，節律性遠不如心肌規則。胃平滑肌對電刺激較不敏感，但對于牽張、溫度和化學刺激則特別敏感，輕微的刺激常可引起強烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環境分不開的，胃內容物對平滑肌的牽張、溫度和化學刺激是引起內容物推進或排空的自然刺激因素。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠胃平滑肌細胞采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠胃平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R208 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
CD3E & CD3G Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 UNC5B / UNC5H2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 IL22RA1 / IL22R 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠胃平滑肌細胞FAM50B蛋白抗體Human CMAS (N-acylneuraminate cytidylyltransferase) ELISA KIT對基-α-D-半乳糖苷
形成素2抗體（成蛋白）Human CCNYL3 (Putative cyclin-Y-like protein 3) ELISA KIT5-尿苷二二鈉鹽
脂閥結構蛋白1抗體Human CDK16 (Cyclin-dependent kinase 16) ELISA KITDL-蘋果酸鈣
成纖維生長因子17抗體Human CAND1 (Cullin-associated NEDD8-dissociated protein 1) ELISA KIT移液器P20，單道大龍移液器P20
成纖維生長因子23抗體Human CCNYL2 (Cyclin-Y-like protein 2) ELISA KIT鐵
成纖維生長因子20抗體Human CWF19L1 (CWF19-like protein 1) ELISA KIT人可溶性凋亡相關因子配體（sFASL）ELISA試劑盒,
成纖維生長因子19抗體Human CRELD1 (Cysteine-rich with EGF-like domain protein 1) ELISA KIT人α干擾素（IFN-α）ELISA試劑盒,IFN-α ELISA kit
成纖維生長因子22抗體Human CLMP (CXADR-like membrane protein) ELISA KIT人抗肝可溶性抗原抗體（SLA）ELISA試劑盒,SLA ELISA
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