詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠輸尿管上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0943 |
商品介紹:
名稱 小鼠輸尿管上皮細胞 2.組織來源:尿道組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠輸尿管上皮細胞分離自輸尿管組織;輸尿管上接腎盂,下連膀胱,是一對細長的管道,呈扁圓柱狀,位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結構,沿腰大肌內側的前方垂直下降進入骨盆。輸尿管有三個狹窄部:一個在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處);一個在越過小骨盆入口處;最后一個在進入膀胱壁的內部。這些狹窄是結石、及壞死組織容易停留的部位。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結構,即瓦耳代爾鞘,它能有效地防止膀胱內尿液返流到輸尿管。臨床上將輸尿管分為上、中、下三段,也可稱為腹段、盆段、膀胱段。其中,腹段自腎盂輸尿管交界處,到跨越髂動脈處;盆段,自髂動脈到膀胱壁;膀胱段,自膀胱壁內斜行至膀胱粘膜、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層,黏膜層、固有層、肌層、外膜。黏膜層表面為移行上皮,約有4-5層細胞;固有層由細密的結締組織構成,內含膠原纖維和少量彈性纖維;輸尿管肌層主要由內縱和外環兩層平滑肌組成;外膜為疏松結締組織,營養血管由外膜進入輸尿管。其中,輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠輸尿管上皮細胞采用先中性蛋白酶消化、然后機械分離法使輸尿管分層、最后膠原酶消化,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠輸尿管上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M071 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 ARPC2 基因全長ORF克隆
大鼠 HNRNPA2B1 基因全長ORF克隆
大鼠 VHL 基因全長ORF克隆
大鼠 SYNA 基因全長ORF克隆
大鼠 KRT5 基因全長ORF克隆
大鼠 PSMD2 基因全長ORF克隆
大鼠 TEX261 基因全長ORF克隆
大鼠 SDHA 基因全長ORF克隆
大鼠 RGD1359108 基因全長ORF克隆
大鼠 ISLR 基因全長ORF克隆
小鼠輸尿管上皮細胞葡萄糖肉湯 英文名稱:Dextrose Broth 產品規格:250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human SUMO-conjugating enzyme UBC9
0.312-20 ng/mL 人低密度脂蛋白受體相關蛋白8 (LRP-8) ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL 人紅細胞膜蛋白質帶4.2(EPB42)ELISA試劑盒
棉子糖-雙岐桿菌鑒定 英文名稱: 產品規格:20支
0.312-20 ng/mL 人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/ml ELISA Kit for Human Immunoglobulin J chain
大腸桿菌/大腸菌群液體顯色培養基 英文名稱:E.Coli/Coliform Broth Chromogenic Medium 產品規格:1000ml
15.6-1000 pg/mL 人催乳素(PRL)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Beta-amyloid protein 42