詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
小鼠雪旺氏細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1039 |
商品介紹:
名稱 小鼠雪旺氏細胞 2.組織來源:神經組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 小鼠雪旺氏細胞分離神經組織;周圍神經系統中的神經膠質細胞稱施萬(schwann,又名雪旺細胞)細胞,它沿神經元的突起分布。施萬細胞包裹在神經纖維上,這種神經纖維叫有髓神經纖維。有髓神經纖維和無髓神經纖維的施萬細胞的形態和功能有所差異,施萬細胞的外表面有基膜,能分泌神經營養因子,促進受損的神經元的存活及其軸突的再生,參與周圍神經系統中神經纖維的構成。施萬細胞的胞核呈長卵圓形,其長軸與軸突平行,核周有少量胞質。由于施萬細胞包在軸突的外面,故又稱神經膜細胞(neurilemmalcell),它的外面包有一層基膜。施萬細胞最外面的一層胞膜與基膜一起往往又稱神經膜(neurilemma),光鏡下可見此膜。在有髓神經纖維發生中,伴隨軸突一起生長的施萬細胞表面凹陷成一縱溝,軸突位于縱溝內,溝緣的胞膜相貼形成軸突系膜(mesaxon)。軸突系膜不斷伸長并反復包卷軸突,把胞質擠至細胞的內、外邊緣及兩端(即靠近郎氏結處),從而形成許多同心圓的螺旋膜板層,即為髓鞘。故髓鞘乃成自施萬細胞的胞膜,屬施萬細胞的一部分。施萬細胞的胞質除見于細胞的外、內邊緣和兩端外,還見于髓鞘板層內的施-蘭切跡。該切跡構成螺旋形的胞質通道,并與細胞外、內邊緣的胞質相通。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠雪旺氏細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠雪旺氏細胞經S-100免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M111 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 LRFN3 基因全長ORF克隆
大鼠 OLR1 基因全長ORF克隆
大鼠 CLEC4A2 基因全長ORF克隆
大鼠 DSC2 基因全長ORF克隆
大鼠 CLEC4B2 基因全長ORF克隆
大鼠 CD36 基因全長ORF克隆
大鼠 CD34 基因全長ORF克隆
大鼠 KLRC1 基因全長ORF克隆
大鼠 CLEC2D 基因全長ORF克隆
大鼠 CLEC5A 基因全長ORF克隆
小鼠雪旺氏細胞HB-PET自誘導培養基 英文名稱:HB-PET Auto-Indection Medium 產品規格:250g
乳酸桿菌選擇性瓊脂 英文名稱:Lactobacillus Selective Agar 產品規格:250g
0.78-50 ng/mL 人肝細胞癌結合蛋白TD26ELISA試劑盒
FB1(Half-Fraser)添加劑 英文名稱: 產品規格:5ml*2
野生酵母培養基 英文名稱: 產品規格:250g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Tetranectin
鼠李糖發酵管 英文名稱: 產品規格:20支
0.156-10 ng/mL 牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.312-20 ng/mL 人細胞質硫氧還蛋白還原1(TR)ELISA試劑盒
七葉苷生化管 英文名稱: 產品規格:20支