詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
MR1(中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤) | 1×10?cells/T25培養瓶 | GOY-01X0661 |
商品介紹:
名稱 MR1(中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤) 種屬中國倉鼠 年齡(性別)不詳 組織來源未知 生長特性懸浮細胞 細胞形態淋巴母細胞 生長培養基RPMI-1640+10% FBS+0.05mM β-mercaptoethanol+1% P/S 推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。 |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
STK40 基因全長ORF克隆
IKBKB 基因全長ORF克隆
CBL 基因全長ORF克隆
CSNK1A1L 基因全長ORF克隆
ST6GAL1 轉錄變體2 基因全長ORF克隆
PDCD6 基因全長ORF克隆
EEF2K 基因全長ORF克隆
STK17B 基因全長ORF克隆
SNAP25 基因全長ORF克隆
LCN1 基因全長ORF克隆
MR1(中國倉鼠X小鼠B淋巴細胞雜交瘤)碘伏(液體) 英文名稱:Povidone-iodine (liquid) 產品規格:500g
TCBS瓊脂 英文名稱:Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar 產品規格:250g
0.156-10 ng/mL 人粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒
雙料月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯(LST) 英文名稱: 產品規格:250g
0.156-10 ng/mL 人內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
牛津瓊脂(OXA)基礎 英文名稱:Oxford Agar Base 產品規格:250g
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-21
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Secreted frizzled-related protein 1
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human BH3-interacting domain death agonist
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Neuroendocrine protein 7B2