詳細介紹
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
大鼠胰腺腺泡細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1309 |
商品介紹:
名稱 大鼠胰腺腺泡細胞 2.組織來源:胰腺組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠胰腺腺泡細胞分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌生長抑素,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺泡主要由錐體形的腺泡細胞組成,與閏管相連,外有基膜,為典型的蛋白質分泌細胞。胰腺泡可分泌多種消化酶,如胰蛋白酶原、胰糜蛋白酶原、胰淀粉酶、胰脂肪酶、DNA 酶和RNA 酶等,分別消化食物中的營養成分 ;胰腺泡也分泌胰蛋白酶抑制因子,防止兩種蛋白酶原被激活,腺泡腔內有泡心細胞,扁平或立方形,色淺,是閏管起始部的上皮細胞,為胰腺腺泡的特點。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠胰腺腺泡細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠胰腺腺泡細胞經亞甲基藍染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R211 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細胞形態圓形 傳代特性不增殖;不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
狗 Fractalkine / CX3CL1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 CXCL16 / SR-PSOX 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Siglec-2 / CD22 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IFNA13 / Interferon alpha-13 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD81 / TAPA-1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
STC2 / Stanniocalcin 2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD47 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠胰腺腺泡細胞鋅指蛋白103抗體Human POLM ELISA Kit牛磺酸
纖維母生長因子7抗體Human POLR1C ELISA KitNa-苯甲酰-DL-精-對硝基酰鹽酸鹽
肺Kruppel樣因子抗體Human POLR1A ELISA Kit亞二乙酸
激肽釋放5抗體Human POLR2J ELISA Kit堿性
激肽釋放13抗體Human POLE3 ELISA Kitβ-葡聚糖
激肽釋放15抗體Human POLG2 ELISA Kit2′-脫氧-5′-三三鈉鹽
激肽釋放2抗體Human POLI ELISA Kit2′-脫氧尿苷-5′-三四鈉鹽
激肽釋放12抗體Human POLM ELISA Kit磺酸