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解析進口elisa酶聯免疫試劑盒實驗失敗的原因
閱讀:225 發布時間:2017-7-28進口elisa酶聯免疫試劑盒新手zui一開始了解的就是其原理,大家都知道這一實驗常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法靈敏,特異性強不需要特殊設備,所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。
ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時常可見到一些錯誤結果如標本的影響,對這一方面我司來為大家細細解讀:
1. 溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質,在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態氧,從而催化底物四甲基聯苯胺生成可溶性的有色物質,即顯藍色,產生假陽性。所以嚴重溶血標本禁用。
2. 標本受細菌污染。因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。
3. 標本保存不當。在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。
塑料試管能吸附抗原物質,樣本久置在塑料管內會使樣本內抗原含量下降造成假陰性。使用真空采血管;并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,EDTA、酶抑制劑可抑制ELISA系統中辣根過氧化物酶活性。
標本凝固不全。 在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在進口elisa酶聯免疫試劑盒測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
右旋安非他命相關物質B標準品 英文名稱: 規格: 25mg CAS號: 103-79-7
喹那普利相關物質A標準品 英文名稱: 規格: 50mg CAS號: 103733-49-9
鹽酸昂丹司瓊對照品標準品 英文名稱: Ondansetron Hydrochloride 規格: 300mg CAS號: 103639-04-9
琥珀酸舒馬曲坦標準品 英文名稱: Sumatriptan Succinate 規格: 200mg CAS號: 103628-48-4
舒馬曲坦標準品 英文名稱: Sumatriptan 規格: 50mg CAS號: 103628-46-2
紫外光吸收劑UV-360標準品 英文名稱: Bisoctrizole 規格: 200mg CAS號: 103597-45-1
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