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小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸elisa檢測(cè)試劑盒?操作步驟
閱讀:210 發(fā)布時(shí)間:2021-11-2小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
小鼠CXCR4(mouse CXCR-4)
小鼠皮質(zhì)酮(mouse Corticosterone)
小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2)
小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(mouse CTGF)
小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4 (mouse CTLA-4)
小鼠細(xì)胞色素P450(mouse Cytochrome P450)
小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP)
小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)
小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)
小鼠CXCL1/KC(mouse KC)
小鼠環(huán)磷酸腺苷(mouse cAMP)
小鼠環(huán)磷酸鳥苷(mouse cGMP)
小鼠睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(mouse CNTF)
小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)
小鼠sCD40配體(mouse sCD40 Ligand)
小鼠CD34(mouse CD34)
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)
小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a)
小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a)
小鼠血清總補(bǔ)體(mouse CH50)
小鼠肌酸激酶(mouse CK)
小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)
小鼠羥甲基賴氨酸(mouse CML)
小鼠C-肽(mouse C-peptide)
小鼠心肌鈣蛋白T(mouse cTnT)
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(mouse G-CSF)
小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)
小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse M-CSF)
小鼠細(xì)胞色素C(mouse Cytochrome C)
小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA)
小鼠多巴胺(mouse Dopamine)