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1、elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格基本原理
 
真核生物中，從個體的生長、發(fā)育、衰老、死亡，到組織的得分華、調(diào)亡以及細(xì)胞對各種生物、理化因子的應(yīng)答，本質(zhì)上都涉及基因的選擇性表達(dá)。高等生物大約有30 000個不同的基因，但在生物體內(nèi)任意8細(xì)胞中只有10%的基因的以表達(dá)，而這些基因的表達(dá)式安事件和空間順序有序地進(jìn)行著，這種表達(dá)的方式即為基因的差異表達(dá)。其包括新出現(xiàn)的基因的表達(dá)與表達(dá)量有差異的基因的表達(dá)。生物體表現(xiàn)出的各種特性，主要是由于基因的差異表達(dá)引起的。
 
2、基本方法與步驟簡述
差別雜交（differential hybridization）又叫差別篩選（differential screening），適用于分離經(jīng)特殊處理而被誘發(fā)表達(dá)的mRNA的cDNA克隆。為了增加這種方法的有效性，后來又發(fā)展出了扣除雜交（subtractive hybridization）技術(shù)。扣除雜交又叫扣除cDNA克隆（subtractive cDNA cloning），它是通過構(gòu)建扣除文庫（subtractive library）得以實現(xiàn)的。
差別雜交的技術(shù)基礎(chǔ)十分簡單，它不需要任何有關(guān)的目的基因的核苷酸序列信息，而重要的是耍擁有兩種不同的細(xì)胞群體：在一個細(xì)胞群體中目的基因正常表達(dá)，在另一個細(xì)胞群體中目的基因不表達(dá)。在這種情況下便可制備到兩種不同的mRNA提取物。其一是含有一定比例的目的基因mRNA種的總mRNA群體，其二是不含有目的基因mRNA種的總mRNA群體。因此，可以通過這兩種總mRNA（或是它們的cDNA拷貝）為探針的平行雜交，對由表達(dá)目的基因的細(xì)胞總mRNA構(gòu)建的克隆庫進(jìn)行篩選。當(dāng)使用存在目的基因的mRNA探針時，所有包含著重組體的菌落都呈陽性反應(yīng)，在x光底片上呈現(xiàn)黑色斑點，而使用不存在目的基因的mRNA探針時，除了含有目的基因的菌落外，其余的所有菌落都呈陽性反應(yīng)，在x光底片上呈現(xiàn)黑色斑點。比較這兩種底片井對照原平板，便可以挑選出含目的基因的菌落，供作進(jìn)一步研究使用。
扣除雜交法的本質(zhì)是除去那些普遍共同存在的、或是非誘發(fā)產(chǎn)生的cDNA序列，從而elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格使欲分離的目的基因的序列得到有效的富集，提高了分離的敏感性。下面以T細(xì)胞受體（T-cellreceptor，TCR有時亦稱之為T細(xì)胞抗原受體）編碼基因的分離為例子，說明扣除雜交篩選法的基本原理與簡要過程。T細(xì)胞和B細(xì)胞來自共同的前體細(xì)胞，兩者都能夠識別特異的抗原。但與B細(xì)胞不同，T細(xì)胞不能識別游離的抗原，而只能識別展現(xiàn)在其它。
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