我們深知每個項目背后的特別需求和挑戰,因此致力于提供高品質定制化的科研服務,滿足您個性化的科研需求。
Absin可以提供全面的定制服務包括:
大分子定制: 多肽/蛋白/抗體定制;線性/環狀mRNA定制;
類器官技術: 類器官定制服務;類器官技術培訓班;類器官平臺搭建服務;
免疫學服務: ELISA檢測服務;多重熒光免疫組化服務;
其他定制與服務:化合物/酶/抗體/蛋白標記服務;抗體/蛋白純化服務;血清定制等。
定制案例一:用于WB/IP/IHC/FC/ELISA等實驗的多抗制備
1、抗原設計
1)客戶提供正確的NCBI號或蛋白序列;
2)技術工程師進行抗原設計。
圖1 抗原性質分析圖
2、抗原制備
原核表達可溶蛋白/化學合成抗原多肽。
3、抗體制備
1)動物免疫:每個抗原免疫2只兔子;
2)抗體純化:動物處死,取血;抗原親和純化抗體;
3)抗體驗證:ELISA驗證。
4、數據準備和發貨
1)數據:抗體制備流程及數據、抗體說明書、可溶蛋白SDS-PEAG/多肽合成的HPLC和MS報告;
2)發貨:抗原親和純化抗體(大于5mg);若客戶需要可提供抗原蛋白0.5mg/目的多肽。
定制案例二:化合物/酶/抗體/蛋白標記服務
Absin可以提供多種常見熒光素標記服務,體系成熟,目前常規染料標記周期1-2周。需要注意的是標記會產生損耗,量越小的情況損耗越大,為盡量減少損耗,我們建議您至少100ug起標。
化合物標記流程:
圖2
我們會根據化合物的結構給出相應的標記建議:
如生物素標記七葉皂苷A:
圖3
標記建議:
生物素可以合成在該結構的羥基上,但是由于多個羥基活性近似,所以會出現多個羥基被結合上生物素的情況。最終合成產物不單一,需要老師確定這種不可避免的情況能否滿足實驗需求。
定制案例三:蛋白表達及純化服務
客戶提供模板或全基因合成基因模板,經過跨膜區預測、抗原性質分析、可能的蛋白結構預測后給出蛋白表達建議。
圖4 可能的蛋白結構預測
評估蛋白整體性質,若蛋白整體性質較好,則可以進行純化流程:
1、擴增克隆到原核可溶表達載體中,測序;
2、小試表達測試,SDS-PAGE;
3、如有表達,進行大規模表達;
4、蛋白純化,SDS-PAGE;
5、透析,SDS-PAGE,保存。
抗體定制常見問題解答
Q1:如何確定選擇單抗還是多抗定制?
A1:單抗是一個B細胞克隆產生的針對一種抗原表位的的單一抗體;多抗是多個B細胞克隆產生的針對多種抗原表位的多種抗體混合物。對抗體特異性要求高,用量較大,需要長期使用一致的抗體,一般選擇單抗(如WB/IP/IF/ICC等)。對抗體的特異性要求不高,需要做沉淀和凝集反應的檢測性實驗或者只需做ELISA檢測,一般選擇多抗。
Q2:定制的抗體沒有找到參考文獻,有推薦的使用濃度嗎?
A2:我們一般推薦先用1:1000做預實驗,根據預實驗結果,調整抗體使用濃度。另外,即使有參考文獻,由于實驗設備、操作體系等因素的影響可能會有所差異,建議老師結合自己的實驗做下測試,以達到最佳的實驗使用效果。
Q3:小鼠腹水得到的抗體和小鼠血清有交叉反應正常嗎?純化后是否可以解決這個問題?
A3:從小鼠腹水中得到的抗體肯定會對小鼠血清有親和性,出現交叉反應屬于正常現象。可以通過抗原親和純化得到特異性的抗體,能夠較好改善交叉反應的現象。但由于純化效率不可能達到100%,因此不能保證消除。
好消息!Absin文獻獎勵重磅升級!
Absin特色產品線:
WB相關:ECL發光液、預染marker、預制膠;IHC相關:二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體;定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
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