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詳細(xì)介紹
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細(xì)閱讀購買說明！
產(chǎn)品名稱：乳酸脫氫酶（LDH）測試盒說明書
規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣
測試方法:微量法、可見分光光度法
貨號：YS-01S6323
測定意義
LDH（EC 1.1.1.27）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是糖酵解途徑的末端酶，催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng)，伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理：
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在堿性溶液中顯棕紅色，顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 。
4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
ER- Alpha(phospho-Ser167)peptide 人磷酸化雌受體α多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Tyr1016) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Neurobasal Medium 500ml Gibco
ZNF516 英文名稱： 鋅指蛋白516抗體 0.2ml
DR4/ 英文名稱： 死亡受體4抗體 0.1ml
自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體 Anei-ATX/Autotaxin/E-NPP2 0.1ml
SCF/MGF ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-AVEN/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Exendin 4 GLP1類似蛋白Exendin4抗體 規(guī)格 0.1ml
Beta-TG (Rabbit Beta-Thromboglobulin) ELISA Kit 兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 96T
英文名稱： 抗體 0.2ml
Amyloid Precursor Protein 英文名稱： 淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml
Anti-AVEN/FITC 熒光素標(biāo)記凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
ZNF575 英文名稱： 鋅指蛋白575抗體 0.2ml
Deltex 1 英文名稱： DTX1抗體 0.2ml
擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 Anti-ATM 0.1ml
Anti-WBSCR14/ChREBP /FITC 熒光素標(biāo)記糖類應(yīng)答元件結(jié)合蛋白ChREBP抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR(Tyr845) 磷酸化表皮生長因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
ELAVL1/HuR peptide ELAVL1/HuR多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
乳酸脫氫酶（LDH）測試盒說明書氨己烯酸阿魏ANDROGEN RECEPTOR 蛋白共沉淀分析試劑盒
O-去甲(D,L)澤瀉ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒
酚磺乙穿心蓮 ER BETA 蛋白表達(dá)流式儀檢測試劑盒
酚磺乙（標(biāo)準(zhǔn)品）棉花根載玻片ER BETA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
氟米松藏菖蒲凍切片組織ER BETA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
氟米松（標(biāo)準(zhǔn)品）芫花條石蠟切片組織ER BETA 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
鹽酸利托君雞蛋花 載玻片ER BETA 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
鹽酸利托君(標(biāo)準(zhǔn)品)地骨皮 凍切片組織ER BETA 蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
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