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碳酸酐酶Ⅷ(CA8)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-22 14:11:08瀏覽次數(shù):281

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱(chēng) Recombinant Carbonic Anhydrase VIII (CA8)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
碳酸酐酶Ⅷ(CA8)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:狂犬病病毒街毒株P(guān)CR檢測(cè)試劑盒Rabies Virus(RV、street virus)RTPCR狂犬病病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒Rabies VirusRTPCR有輪瑞氏絳蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒Raillietina cesticillusPCR棘盤(pán)瑞氏絳蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒Raillietina echinobothridaPCR狂犬病病毒通用PCR檢

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng):碳酸酐酶Ⅷ(CA8)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱(chēng):Recombinant Carbonic Anhydrase VIII (CA8)

CAVIII; CA-VIII; CALS; CARP; Carbonic anhydrase-related protein

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測(cè)分子量:36.7KDa

實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Met1~Gln290 with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):-

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:
胍乙酸-N-甲基轉(zhuǎn)移酶(GAMT)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Guanidinoacetate-N-Methyltransferase (GAMT)Homo sapiens (Human,人)

胱硫醚β合酶(CbS)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Cystathionine Beta Synthase (CbS)Mus musculus (Mouse,小鼠)

胱天蛋白酶1(CASP1)活性蛋白英文名稱(chēng):Active Caspase 1 (CASP1)Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

胱天蛋白酶1(CASP1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Caspase 1 (CASP1)Homo sapiens (Human,人)

圖片6.png


標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類(lèi):一類(lèi)是短肽類(lèi)標(biāo)簽;一類(lèi)是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。

RPL15產(chǎn)品名稱(chēng): 核糖體蛋白L15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

SRC產(chǎn)品名稱(chēng): src原基因單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Nardilysin產(chǎn)品名稱(chēng): N精氨suan二元轉(zhuǎn)化蛋白NRD1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, Sheep

CD146產(chǎn)品名稱(chēng): 黑色su細(xì)胞粘附分子CD146單克隆抗體產(chǎn)品別名: CD 146; Cell surface glycoprotein MUC18; Cell surface glycoprotein P1H12; S endo 1; S endo 1 endothelial associated antigen; Sendo 1 endothelial associated antigen; MUC 18; CD146 antigen; Melama associated antigen MUC18; Melama associated glycoprotein MUC18;

MPND產(chǎn)品名稱(chēng): MPND蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep

TKTL2產(chǎn)品名稱(chēng): 轉(zhuǎn)酮醇mei樣蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

SF3B14產(chǎn)品名稱(chēng): 選擇性剪接因子3B亞基14抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

HIP1產(chǎn)品名稱(chēng): 亨廷頓(舞蹈)相互作用蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse, Rabbit

CPSF73產(chǎn)品名稱(chēng): 剪切和多聚苷suan化特異性因子73蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

Centrin 3產(chǎn)品名稱(chēng): 中心體蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
碳酸酐酶Ⅷ(CA8)重組蛋白人封閉蛋白17(CLDN17)ELISA試劑盒CLDN17封閉蛋白17elisa kitHuman Claudin 17(CLDN17)ELISA Kit

人封閉蛋白16(CLDN16)ELISA試劑盒CLDN16封閉蛋白16ELISA試劑盒Human Claudin 16(CLDN16)ELISA Kit

人封閉蛋白15(CLDN15)ELISA試劑盒CLDN15封閉蛋白15elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Claudin 15(CLDN15)ELISA Kit

人封閉蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒CLDN14封閉蛋白14elisa檢測(cè)試劑盒Human Claudin 14(CLDN14)ELISA Kit

人封閉蛋白12(CLDN12)ELISA試劑盒CLDN12封閉蛋白12elisa kitHuman Claudin 12(CLDN12)ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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