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詳細介紹
實驗步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環，通過多次循環反應，使目的DNA得以迅速擴增。其要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
【產品名稱】莫拉氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Moraxella spp.
【產品編號】YSP6936
【包裝規格】50T
【預期用途】
產品僅用于科研本產品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測，所用儀器為實時熒光PCR儀，可通過實時擴增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗原理】
本試劑盒采用實時熒光PCR技術，針對鴨源性成分核酸序列設計特異性引物和熒光探針，通過實時熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對鴨源性成分核酸進行定性檢測。
*的擴增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優化的反應體系保證更高的擴增效率。以相同量的293T細胞cDNA為模板，擴增β-actin基因，與同類產品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴增信號更強，擴增效率更高。
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PCR實驗方法步驟：
莫拉氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
產品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
Oridonin腫瘤壞死因子β檢測試劑盒20mg
H4-IIE(大鼠肝細胞 )5×106cells/瓶×2
狀腺球蛋白(TG)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 GFER / ALR 蛋白 (His 標簽)*250(g)
MMP8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶CAS號：113791 脂氧合酶檢測試盒100THuman/人Elisa試盒3034488
Sodium Danshensu腫瘤壞死因子γ檢測試劑盒20mg
偽原薯蕷皂苷 質量規格：HPLC≥98%，標準品 Pseduoprotodioscin
組蛋白H2B(H2B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 RGS5 / Regulator of G-protein signaling 5 蛋白 (His 標簽)*250(g)
(MMP7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶7CAS號：113617633 總氨基檢測試盒50THuman/人Elisa試盒3034488
AR1g5g肌(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點法)SCUBE2
牛磺豬去氧膽鈉 質量規格：≥98%,國進口 Sodium taurohyodeoxycholate hydrate 蓋囊側耳 Pleurotus cystidiosus中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
Guinea IgG (親和純化) 豚鼠IgG進口、原裝酰輔酶A檢測試盒25mgHuman/人Elisa試盒4774145
99%5g1g肌(Cr)檢測試劑盒(PA速率比色法)matrix metalloproteinase 2
千層紙素 訂購|咨詢 規格： HPLC≥98%;20mg ELISA Kit for Human Axin-1小鼠胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)ELISA試劑盒，英文名：IGF-1R ELISA Kit
Guinea IgM (親和純化) 豚鼠IgM現貨供應輔酶ASH檢測試盒500mgHuman/人Elisa試盒4774145
馬卡因CCK試劑盒5mg
京尼平苷(標準品) 質量規格：HPLC≥98%,標準品 Geniposidic acid 爪哇根霉無花果曲霉變種 Aspergillus ficuum var.
Nutrient Agar250腮腺炎病IgM抗體檢測試盒5mg骨堿性酶檢測試盒N.TerminalPropeptideoftypeICollagen
莫拉氏菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒3O咖?？鼘?3Ocaffe CAS號： 327979 規格： 20mg 訂購|咨詢
輪環藤寧;Cyclen CAS號： 294906 規格： 20mg 訂購|咨詢
龍膽山;Bellidifolin CAS號： 2798256 規格： 10mg 訂購|咨詢
麗江頭堿;Foresaconitine CAS號： 規格： 10mg 訂購|咨詢
雷公藤氯內;Tripchloroli CAS號： 規格： 20mg 訂購|咨詢
藜蘆;3,4Dimethoxyben CAS號： 規格： 20mg 訂購|咨詢
靈芝A;Ganoderic acid CAS號： 81907622 規格： 20mg 訂購|咨詢
雷公藤內;Wilforlide A CAS號： 84104712 規格： 20mg 訂購|咨詢
龍血素C;Cochinchinenin CAS號： 956103790 規格： 20mg 訂購|咨詢
龍血素B ;Loureirin B CAS號： 119425900 規格： 20mg 訂購|咨詢
龍血素A;Loureirin A CAS號： 119425897 規格： 20mg 訂購|咨詢
輪環藤堿;Cycleanine CAS號： 518945 規格： 20mg 訂購|咨詢
羅紅;Roxithromycin CAS號： 80214831 規格： 200mg 訂購|咨詢
雷公藤吉堿;Wilforgine CAS號： 37239477 規格： 10mg 訂購|咨詢
雷公藤次堿;Wilforine CAS號： 11088098 規格： 10mg 訂購|咨詢
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