產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 3 (LOXL3) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-22 11:08:06瀏覽次數(shù):325
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 3 (LOXL3) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:賴氨酰氧化酶樣蛋白3(LOXL3)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 3 (LOXL3)
LOXL; Lysyl oxidase homolog 3
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::分泌, 細(xì)胞外基質(zhì) 預(yù)測(cè)分子量:27.4kDa 實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Thr519~Asn726 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點(diǎn):6.1 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Mouse GDF11宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Mouse
Recombinant Human USP15宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human IRF5宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human SFTPA1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
Insulin產(chǎn)品名稱: 胰島su抗體交叉反應(yīng): Human, Pig
FAM194A產(chǎn)品名稱: FAM194A蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig
SFRP1產(chǎn)品名稱: 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
DUSP28產(chǎn)品名稱: 雙特異性磷suanmei抗體28抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
Cdc14A產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞周期調(diào)控因子14A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
hCG beta產(chǎn)品名稱: 人β亞基人絨毛膜促性激su(β HCG)抗體交叉反應(yīng): Human
NQO2產(chǎn)品名稱: NAD(P)H 脫氫mei 2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
RNF45產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白45/自分泌運(yùn)動(dòng)因子受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit
NECAP2產(chǎn)品名稱: NECAP2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
Serine carboxypeptidase 1產(chǎn)品名稱: 絲氨suan羧肽mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
賴氨酰氧化酶樣蛋白3(LOXL3)重組蛋白人驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員20A(KIF20A)ELISA試劑盒KIF20A驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員20AELISA試劑盒Human Kinesin Family, Member 20A(KIF20A)ELISA Kit
人驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1A(KIF1A)ELISA試劑盒KIF1A驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員1Aelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Kinesin Family, Member 1A(KIF1A)ELISA Kit
人驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員18A(KIF18A)ELISA試劑盒KIF18A驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員18Aelisa檢測(cè)試劑盒Human Kinesin Family, Member 18A(KIF18A)ELISA Kit
人驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員14(KIF14)ELISA試劑盒KIF14驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員14elisa kitHuman Kinesin Family, Member 14(KIF14)ELISA Kit
人驅(qū)動(dòng)蛋白2(KNS2)ELISA試劑盒KNS2驅(qū)動(dòng)蛋白2ELISA試劑盒Human Kinesin 2(KNS2)ELISA Kit