詳細介紹
產品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設計的專一性引物,與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數規格:
產品名稱:巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Macrococcus spp.
產品規格:50T
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好。
?
實驗過程:
一、巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準備
1. DNA模板
2.產品僅用于科研對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
以下是公司正在熱銷的產品:
模式菌株分類擔子菌類酵母Polycl Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-MAP1LC3B Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C12H10N4O2性狀:Yellow powder純度:%
Anti-ABCC5 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-TLR4 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C29H37NO5性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ABCC9 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-β-Tubulin Polyclonal antibody宿主: Rabbit分子式:C27H43NO3性狀:Powder純度:98.5%
Anti-ABCE1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-NFE2L2 Polyclonal Antibody分子式:C27H43NO3性狀:Powder純度:96.0%
Anti-ABCF1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-BAX Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C27H45NO3性狀:Powder純度:98.5%
Anti-ABCF2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-AKT1 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C15H15NO2性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ABCF2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-BTLA Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H17N3O性狀:Powder純度:98.5%
Anti-ABCG1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CENPH Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C31H43NO7性狀:Powder純度:%
Anti-ABCG2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-SIGLEC15 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C16H21NO4性狀:Oil純度:%
Anti-ABCG2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-Lamin B1 Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C15H19NO3性狀:Powder純度:%
Anti-ABCG4 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-FLT4 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C13H15NO2性狀:Powder純度:98.0% 14-Dehydrobrowniine特異性: 人APCDD1 mRNA原位雜交試劑盒
Acutumine特異性: 蜜蜂Apis mellifera mRNA原位雜交試劑盒
14-Dehydrodelcosine特異性: 人APOER2 mRNA原位雜交試劑盒
Emeheterone特異性: 人、大鼠、小鼠AQP1 mRNA原位雜交試劑盒
3,6-Dibenzyl-2-hydroxy-5-methoxypyrazine特異性: 人、大鼠、小鼠AQP2 mRNA原位雜交試劑盒
6-Methoxydihydrosanguinarine特異性: 人、大鼠、小鼠、兔AQP4 mRNA原位雜交試劑盒
6-Ethoxydihydrosanguinarine特異性: 人、大鼠、小鼠AQP3 mRNA原位雜交試劑盒
Anti-ABHD5 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CASP3 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C24H39NO6性狀:Powder純度:97.5%
Anti-ABL1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-AFP Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C18H13N3O2性狀:Brown powder純度:97.5%
Anti-ABL2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-IL6 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C10H19NO性狀:Oil純度:%
Anti-ABLIM1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-α-Tubulin Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C22H31NO3性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ACAA1 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-IL1B Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C6H9NO3性狀:Oil純度:%
Anti-ACAA2 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-DiMethyl-Histone H3-K79 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C24H39NO7性狀:Powder純度:%
Anti-ACAD11 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-MLKL Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C16H19NO3性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ACAD8 Polyclonal Antibody宿主: Mouse 英文名稱: Anti-MAP3K7 Monoclonal Antibody分子式:C23H37NO6性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ACAD9 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-PARP Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C9H11NO3性狀:Powder純度:%
Anti-ACAD9 Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-CD63 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C20H24ClNO4性狀:Powder純度:%
Anti-ACADS Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-TLR4 Polyclonal Antibody宿主: Rabbit分子式:C19H27NO性狀:Powder純度:98.0%
Anti-ACADS Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-STAT3 Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:C20H24N2O2性狀:Powder純度:97.0%
Anti-ACADVL Polyclonal Antibody宿主: Rabbit英文名稱: Anti-VCL Polyclonal Antibody分子式:C19H24N2O2性狀:Powder純度:97.5%
Anti-ACADVL Polyclonal Antibody英文名稱: Anti-Cleaved PARP Monoclonal Antibody宿主: Mouse 分子式:?囊菌類酵母菌。飼料酵母
巨球菌探針法熒光定量PCR試劑盒LC3(APG8B)(NT)抗體 LC3 (APG8B) (NT) Antibody
LC3(APG8A)(NT)抗體 LC3 (APG8A) (NT) Antibody
LC3(APG8A)(IsoformAspecific)抗體 LC3 (APG8A) (Isoform A specific) Antibody
LC3(APG8)抗體(克隆號166AT1234) LC3 (APG8) Antibody (Clone 166AT1234)
LA相關蛋白1B LAR1B Polyclonal Antibody
LA相關蛋白1 LARP1 Polyclonal Antibody
Latrophilin-1(胞外)抗體(50ul) Anti-Latrophilin-1 (extracellular)
Latrophilin-1(胞外)抗體(0.2ml) Anti-Latrophilin-1 (extracellular)
LASS5抗體 LASS5 Antibody,CerS5,FLJ25304,LASS5,MGC45411,Trh4