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詳細介紹
【產品名稱】膿腫分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Mycobacterium abscessus complex
【產品編號】YSP6942
【包裝規格】50T
【預期用途】
產品僅用于科研本產品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測，所用儀器為實時熒光PCR儀，可通過實時擴增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗原理】
本試劑盒采用實時熒光PCR技術，針對鴨源性成分核酸序列設計特異性引物和熒光探針，通過實時熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對鴨源性成分核酸進行定性檢測。
*的擴增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優化的反應體系保證更高的擴增效率。以相同量的293T細胞cDNA為模板，擴增β-actin基因，與同類產品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴增信號更強，擴增效率更高。
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PCR實驗方法步驟：
膿腫分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
實驗步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環，通過多次循環反應，使目的DNA得以迅速擴增。其要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
98%100g5g苦瓜皂苷 F1111477Melanomaassociated antigen 1
氧化芍藥苷 訂購|咨詢 規格： HPLC≥98%；20mg/vial 酐酶12抗體 S100A11 ELISA Kit S100鈣結合蛋白A11(S100A11)ELISA試劑盒
Astragaloside阿苯達唑標準品規格：規格：人花生四烯5脂加氧酶（5-lipoxygenase）Polyclonal Antibody 0.2ml
人III型前膠原氨基端肽（PIIINT）CBLL1/Ecadherin binding protein E7 上皮鈣粘附分子結合蛋白E7規格:96T/48TBeta Alanine規格:50mgB71檢測試盒20mg人惡性非霍奇金淋瘤患者的自然殺傷細胞，NK92細胞1x10^6cells
Salidroside中華肝吸蟲檢測試劑盒5mg
醉椒素 ;Yangonin 規格： 10mg 訂購|咨詢 TBST500ml國產
Astragaloside IV重組人白蛋白4.92mg標準品規格：規格：人花生四烯-15-脂加氧酶B(ALOX15B)Polyclonal Antibody 0.2ml
人C反應蛋白（CRP）ELISA試盒BTRC2/beta TRCP2 BTRC2蛋白抗體規格:96T/48TLAlanine規格:10mgB7同系物6檢測試盒20mg人惡性黑色素瘤細胞，A375EGFP細胞1x10^6cells
98%5g1g總膽固醇(TC)檢測試劑盒(雙試劑CODPAP比色法)HLA class II histocompatibility antigen DQ chain
草鈉容量分析用溶液標準物質(0.05M) 質量規格：0.05M Sodium oxalate solution
Mouse IgG (免疫親和純化) 小鼠IgG*胱硫β裂解酶檢測試盒10gHuman/人Elisa試盒4781833
強力EB去毒劑5mg
脒多粘菌素B瓊脂基礎炭疽桿菌的培養及初步鑒定250克國產/進口
Mouse IgM 小鼠IgM (免疫親和純化)進口、分裝煙酰胺核糖基轉移酶檢測試盒25gHuman/人Elisa試盒478980039
柰苷強力EB去毒劑5mg
剛果紅(分析標準品,≥97.0%(HPLC)) 質量規格：分析標準品,≥97.0%(HPLC) Congo red
Blood Agar Base N0.2250拓撲異構酶1檢測試盒5mg抗酒石性酶檢測試盒Estradiol
膿腫分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒柯里拉京;corilagin CAS號： 23094691 規格： 20mg 訂購|咨詢
咖;Caffeic acid CAS號： 331395 規格： 20mg 訂購|咨詢
苦參堿;Matrine CAS號： 519028 規格： 20mg 訂購|咨詢
苦杏仁苷;Amygdalin CAS號： 29883156 規格： 20mg 訂購|咨詢
假荊芥屬苷;Nepitrin CAS號： 569904 規格： 20mg 訂購|咨詢
5O維阿斯米;5OMethy CAS號： 80681421 規格： 10mg 訂購|咨詢
京尼平龍膽雙糖苷;Genipin1b CAS號： 29307606 規格： 10mg 訂購|咨詢
堅牢藍BB鹽;Fast Blue BB CAS號： 5486840 規格： 100mg 訂購|咨詢
8氧異歐前胡內;Cnidilin CAS號： 14348222 規格： 20mg 訂購|咨詢
麥冬黃B;Methylophio CAS號： 74805917 規格： 20mg 訂購|咨詢
麥冬黃A;Methylophio CAS號： 74805928 規格： 20mg 訂購|咨詢
7氧香素;7Methoxyco CAS號： 531599 規格： 20mg 訂購|咨詢
酒石長春質堿;Catharanthin CAS號： 2468215 規格： 20mg 訂購|咨詢
枸櫞血根堿;Sanguinarine CAS號： 規格： 20mg 訂購|咨詢
酒石長春瑞濱;VinorelbineT CAS號： 125317397 規格： 20mg 訂購|咨詢
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
產品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
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