詳細(xì)介紹
產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:田鼠分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Mycobacterium microti
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的DN段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好。
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、田鼠分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
≥99.0% (sum of enantiomers, HPLC)25g25g黨參炔醇111717activated coagulation factor Ⅻ
去氫駱駝蓬堿 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/支 β3能受體抗體 PI3K ELISA Kit 脂肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
α-血紅蛋白穩(wěn)定蛋白(αHSP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白 (His 標(biāo)簽)*1000(g)
人17羥皮質(zhì)類固醇(17OHCS)OGFOD2 末端多聚腺苷2蛋白抗體規(guī)格:96T/48T規(guī)格:1.5gcAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白檢測(cè)試盒250mg人肺鱗癌細(xì)胞,SKMES1細(xì)胞1x10^6cells
≥99.0% (sum of enantiomers, HPLC)1g1g鶴慶五味子辛素107028activated protein C
鹽依匹斯汀 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Epinastine HCl 改良月桂基鹽胰蛋白胨肉湯(MLST) 規(guī)格: 250g 用途: 用于奶粉中阪崎腸桿菌的檢驗(yàn)的增菌和分子生物學(xué)檢驗(yàn)方法(PCR)選擇性增菌(GB 4789.40-2010和SN1...
粘蛋白1(MUC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)重組人 PLA2G2D / Phospholipase A2 IID 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)*250(g)
AQP5(Human Aquaporin 5) ELISA Kit 人水通道蛋白5CAS號(hào):111820 黃嘌呤氧化酶檢測(cè)試盒100mlHuman/人Elisa試盒304448553
96%25g1g維生素B1定性檢測(cè)試劑盒(重氮化氨基磺法)6phosphofructokinase2
甲基正壬 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1ml 著絲粒蛋白K RANA ELISA Kit 人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)ELISA試劑盒
Goat AntiChicken Whole serum 羊抗雞IgG抗血清進(jìn)口、分裝補(bǔ)體片段檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒480449705
96%1005g脫核糖核(DNA)檢測(cè)試劑盒(二比色法)folliclestimulating hormone receptor
銀杏C13:0 英文名稱:Ginkgo acid C13:0 保存:-20℃ 規(guī)格:HPLC≥98% 10mg/支 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因3抗體
Mouse Antihuman IgG Whole serum 小鼠抗人IgG抗血清進(jìn)口、原裝卵清蛋白IgG1抗體檢測(cè)試盒25gHuman/人Elisa試盒4805225
97%10ml1g脫核糖核(DNA)檢測(cè)試劑盒(二比色法)luteinizing hormone receptor
草素 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 化Disabled 1抗體 MCPH1 ELISA Kit 微腦脂1(MCPH1)ELISA試劑盒
50人份/5支卡介苗抗體檢測(cè)試盒5mg皮質(zhì)醇檢測(cè)試盒Testoterone
田鼠分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒飛蓬苷;Erigeroside CAS號(hào): 59219760 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
富馬 ; Fumaric acid CAS號(hào): 110178 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
腐 ;1,4Diaminobuta CAS號(hào): 110601 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
泛鈣;Calcium pantothe CAS號(hào): 137086 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
3,6′二芥子酰蔗糖;3,′6d CAS號(hào): 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
芳樟;Linalool CAS號(hào): 78706 規(guī)格: 0.5ml 訂購|咨詢
番瀉苷元B;Sennidin B CAS號(hào): 517442 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
番瀉苷元A;Sennidin A CAS號(hào): 641123 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
扶桑甾;betarosasterol CAS號(hào): 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
佛手柑內(nèi);Bergapten CAS號(hào): 484208 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
防諾林堿;Fangchinoline CAS號(hào): 436771 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
茯苓;Pachymic acid CAS號(hào): 29070926 規(guī)格: 5mg 訂購|咨詢
反式茴香腦;transAnethole CAS號(hào): 104461 規(guī)格: 0.1ml 訂購|咨詢
番瀉苷B;Sennoside B CAS號(hào): 128574 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
番茄紅素;Lycopene CAS號(hào): 502658 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢