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詳細介紹
實驗步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環，通過多次循環反應，使目的DNA得以迅速擴增。其要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
【產品名稱】巴氏*線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Nematodirus battus
【產品編號】YSP7002
【包裝規格】50T
【預期用途】
產品僅用于科研本產品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測，所用儀器為實時熒光PCR儀，可通過實時擴增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗原理】
本試劑盒采用實時熒光PCR技術，針對鴨源性成分核酸序列設計特異性引物和熒光探針，通過實時熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對鴨源性成分核酸進行定性檢測。
*的擴增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優化的反應體系保證更高的擴增效率。以相同量的293T細胞cDNA為模板，擴增β-actin基因，與同類產品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴增信號更強，擴增效率更高。
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PCR實驗方法步驟：
巴氏*線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
產品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
Osthole載脂蛋白A1檢測試劑盒20mg
異托銨（標準品） 質量規格：含量測定 IPRATROPIUM BROMIDE 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum廣州蒼白桿菌 Escherichia coli
Osthole3-氨基-2,4,6-三碘苯標準品規格：規格：人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)CLIA試劑盒 0.2ml
人OPNphosphoGluR1(Ser849) 化谷氨受體1抗體規格:96T/48TAmitraz規格:100mgD乳檢測試盒20mg人喉癌細胞,TU686細胞1x10^6cells
Protodioscin載脂蛋白A1檢測試劑盒20mg
遠志山III 訂購|咨詢 規格： HPLC≥98%;20mg 原癌基因cMAF抗體 APOL4 ELISA Kit 載脂蛋白L4(APOL4)ELISA試劑盒
Muscone
人骨保護素(OPG)ZNF471 鋅指蛋白471抗體規格:96T/48TAmitriptyline Hydrochloride規格:1．5gD乳鹽檢測試盒20mg人喉癌細胞，TU212細胞1x10^6cells
98%5g25ml琥珀脫酶(SDH)檢測試劑盒(INT比色法)platelet associated IgG
4-(反-4-基環己基)(>98.0%(GC)) 質量規格：>98.0%(GC) 4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile 293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系
骨髓基質細胞抗原2檢測試盒20mgCD45分子檢測試盒Clusterofdifferentiation4
98%25g100ml琥珀脫酶(SDH)檢測試劑盒(INT微板法)purified protein derivative antibody
辛乙酯(Standard for GC,>99%(GC)) 質量規格：Standard for GC,>99%(GC) Ethyl octanoate
Cholic acidBR，98%靶向核糖核酶檢測試盒20mgCD4分子檢測試盒Clusterofdifferentiation8
98%5g25g乳脫酶(LDH)檢測試劑盒(二硝基肼比色法)Chlamydiapneumoniae IgA
鈣非依賴性脂酶A2(iPLA2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)
脫氧核糖核酶Ⅰ檢測試盒20mgCD8分子檢測試盒cJunNterminalkinases
巴氏*線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒N金雀花堿碘鹽 CAS號： 20013223 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
五水合司巴；五水合金雀花堿；五 CAS號： 1556278 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
3羥9,10二氧紫檀；美迪 CAS號： 73340417 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
寶藿苷II；大花羊藿苷A；意卡瑞苷A CAS號： 55395078 規格： HPLC≥98%;5mg 訂購|咨詢
3O糖苷；莰菲3O CAS號： 17650849 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
木犀草素7O新橙皮糖苷 CAS號： 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
巨大戟3,4:5,20雙縮 CAS號： 77573445 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
巨大戟5,20縮3當歸 CAS號： 87980685 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
巨大戟5,20縮 CAS號： 77573434 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
巨大戟3O當歸 CAS號： 75567372 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
當歸 CAS號： 94487748 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
當歸 CAS號： 565639 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
皂皮 CAS號： 631016 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
美商陸 CAS號： 54928051 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
介芬 CAS號： 460590 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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