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詳細介紹
實驗步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環，通過多次循環反應，使目的DNA得以迅速擴增。其要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
【產品名稱】綠膿假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Pseudomonas aeruginosa
【產品編號】YSP7120
【包裝規格】50T
【預期用途】
產品僅用于科研本產品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測，所用儀器為實時熒光PCR儀，可通過實時擴增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗原理】
本試劑盒采用實時熒光PCR技術，針對鴨源性成分核酸序列設計特異性引物和熒光探針，通過實時熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對鴨源性成分核酸進行定性檢測。
*的擴增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優化的反應體系保證更高的擴增效率。以相同量的293T細胞cDNA為模板，擴增β-actin基因，與同類產品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴增信號更強，擴增效率更高。
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PCR實驗方法步驟：
綠膿假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
產品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
99%100g25g3,4'O二基鞣花10458147Antiimmunobulin Binding Protein Antibody
化十六基*銨瓊脂培養基 規格： 250g 用途： 用于綠膿桿菌及其它革蘭氏性非發酵菌的選擇性分離培養。(《中華人民共和國藥典》2010年版)
白介素10(IL10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 蛋白 (Fc 標簽)*25000 mL/瓶
人內皮素（ET1）GSTCD 谷胱甘肽硫轉移酶C段結構域抗體規格:96T/48T規格:25mgα甘露糖苷酶檢測試盒20mg人胃癌細胞，MGC803細胞1x10^6cells
99%25g100g4,4'O二基鞣花34183227antigliadin antibody
澤瀉醇C-23-醋酯;澤瀉醇C單乙酯 質量規格：HPLC≥98%，標準品 Alisol C monoacetate
白介素1β(IL1β)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 CTRL-1 / CTRL / Chymotrypsin-like protease 蛋白 (His 標簽)*1000 mL/瓶
HRD(Human Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素CAS號：1267397紫黃質檢測試盒1gHuman/人Elisa試盒3141240
98%25g25g透明質酶Retro virus
鹽尼莫司汀 英文名稱：Nimustine hydrochloride 保存：-20℃ 規格：30mg 絲氨/蘇氨蛋白激酶Plk1抗體
MMP7(Matrilysin/matrix metalloproteinases7) 基質金屬蛋白酶7(抗原)*UDP葡糖醛基轉移酶1家族多肽A6檢測試盒5gHuman/人Elisa試盒5006666
98%1g100g透明質酶AlphaEndorphin
鹽賽洛唑啉 質量規格：>98%,BR Xylometazoline hydrochloride 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeA-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株
MMP14(Matrix metalloproteinase14) 金屬基質蛋白酶14進口、分裝UDP葡糖醛基轉移酶1家族多肽A9檢測試盒1gHuman/人Elisa試盒5006666
98%500g500g膠原酶Kallikrein 9
蝙蝠葛蘇林堿 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢 ELISA Kit for Human Perilipin-1大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA試劑盒，英文名：IL-1sRⅡ ELISA Kit
DRCA食品和其他物質中梭菌的計數和培養肌球蛋白ⅦA檢測試盒20mg熱休克蛋白90檢測試盒pregnancyassociatedplasmaproteinA
綠膿假單胞菌探針法熒光定量PCR試劑盒多紫杉三水(標準品)βAlanine,99%25G通用試劑
鹽多齊III型LAlanine ethlester hydrochloride5G通用試劑
鹽多齊III型(標準品)NωNitroLarginine methyl ester hydr...1G通用試劑
達馬莫德LCitrulline,≥98%5G通用試劑
鹽多佐；鹽杜塞酰DOrnithine HCL,98%500MG通用試劑
鹽多佐；鹽杜塞酰（標準品）LAspartic acid sodium salt,≥98%25G通用試劑
甲磺多沙唑嗪LAspartic acid Mg salt,≥98%100G通用試劑
甲磺多沙唑嗪（標準品）DAspartic acid,99%5G通用試劑
鹽多柔比星/鹽阿DLAspartic acid,≥99%25G通用試劑
鹽多柔比星/鹽阿(標準品)DLAsparagine monohydrate,≥99.0%25G通用試劑
鹽強力/鹽多西環素DGlutamic acid,≥99%5G通用試劑
鹽強力/鹽多西環素（標準品）LGlutamic acid monosodium salt hydrat...100G通用試劑
維生素K3,甲醌DLGlutamine,99%25G通用試劑
維生素K3,甲醌(標準品)DLIsoleucine,99%5G通用試劑
益康唑DLLeucine,≥99%10G通用試劑
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