斯氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。

實驗步驟：
典型的PCR由
（1）高溫變性模板；
（2）引物與模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反應組成一個循環，通過多次循環反應，使目的DNA得以迅速擴增。其要步驟是：
將待擴增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側的兩條單鏈互補結合，兩個引物在模板上結合的位置決定了擴增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因為模板從5’→3’方向延伸，合成DNA的新互補鏈。
【產品名稱】斯氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒
【英文名稱】Providencia stuarti
【產品編號】YSP7118
【包裝規格】50T
【預期用途】
產品僅用于科研本產品可用于肉及肉制品中鴨源性成分的定性檢測，所用儀器為實時熒光PCR儀，可通過實時擴增曲線判斷樣品中是否存在鴨源性成分。
【檢驗原理】
本試劑盒采用實時熒光PCR技術，針對鴨源性成分核酸序列設計特異性引物和熒光探針，通過實時熒光一步法RT-PCR（Taqman探針法）對鴨源性成分核酸進行定性檢測。
*的擴增性能:
高性能的UNICONTM Taq DNA聚合酶及優化的反應體系保證更高的擴增效率。以相同量的293T細胞cDNA為模板，擴增β-actin基因，與同類產品相比，UNICONTM qPCR Master Mix擴增信號更強，擴增效率更高。
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PCR實驗方法步驟：
斯氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環步驟	溫度	時間	循環數
預變性	94℃	5   min	1
變性	94℃	10   sec	30-40
退火	50-65℃	20   sec	30-40
延伸	72℃	30   sec/kb	30-40
終延伸	72℃	5   min	1

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
產品僅用于科研其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
Ginsenoside Rd胰島素檢測試劑盒20mg

 10% NaC1胰胨水發酵管BR20支國產/進口

蛋白酶激活受體2(PAR2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 ETHE1 / HSCO 蛋白 (His 標簽)*5000 mL/瓶

CA199(Human Carbohydrate antigen199) ELISA Kit  人糖鏈抗原199CAS號：1327543新黃質檢測試盒10gHuman/人Elisa試盒3141240

97%1g5g金罌粟50657AntiThrombin Ⅲ antibody

甲酰芍藥苷(標準品) 質量規格：HPLC≥98%，標準品 benzoylpaeoniflorin

胱天蛋白酶8(CASP8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)重組人 Profilin 2 / PFN2 蛋白 (His 標簽)*1000 mL/瓶

人心肌細胞膜B1ARPMS1  腫瘤錯配修復基PMS1抗體規格:96T/48T規格:25mgα淀粉酶檢測試盒20mg人微血管內皮細胞株，HMEC1細胞1x10^6cells

Super Fluor 647（效果同Alexa Fluor 647）琥珀酰亞20mg

 人胃腸道間質瘤細胞英文名稱：GIST

Andrade,s Carbohydrate Broth細菌的糖發酵試驗黑色素瘤相關抗原D4檢測試盒20mg醛固檢測試盒Ischemiamodifiedalbumin

Super Fluor 555（效果同Alexa Fluor 555）琥珀酰亞20mg

甲嘧磺隆(標準品) 質量規格：分析標準品 Sulfometuron-methyl

HLGB細菌的氧化發酵試驗白細胞介素1受體樣1檢測試盒20mg缺血修飾白蛋白檢測試盒HeatShockProtein27

Super Fluor 488（效果同Alexa Fluor 488）琥珀酰亞20mg

1,8-辛二醇(>98%,BR) 質量規格：>98%,BR 1,8-Octanediol 人卵巢紫杉醇耐藥株英文名稱：A2780/Taxol 

Egg Yolk Agar Medium Base肉梭菌、產氣莢膜梭菌的分離培養黑色素瘤相關抗原D4抗體檢測試盒20mg熱休克蛋白27檢測試盒HeatShockProtein70
斯氏普羅威登斯菌探針法熒光定量PCR試劑盒粘桿菌素(標準品)Linalool,97%25ML通用試劑

鹽依氟鳥氨Corn steep liquor500G通用試劑

色甘(?)Bornyl acetate,97%25G通用試劑

色甘（標準品）Pyridinium ptoluenesulfonate,≥99.0%5G通用試劑

環孢菌素,環孢素A,環孢A1,2Dichloroethylene,98%25ML通用試劑

環孢菌素,環孢素A,環孢A（標準品）2Sulfobenzoic acid,98%25G通用試劑

鹽噻氯匹定12Crown4,98%1G通用試劑

鹽噻氯匹定（標準品）Benzo18crown6,98%1G通用試劑

阿糖胞苷(進分)Tetraethylene Glycol Diptosylate,97%10G通用試劑

阿糖胞苷2Bromo1ethylpyridinium tetrafluoro...5G通用試劑

阿糖胞苷（標準品）Bromotris(dimethylamino)phosphonium he...1G通用試劑

達卡巴嗪Pyrophosphoric acid,≥90%50G通用試劑

達卡巴嗪(標準品)PHYTIN25G通用試劑

達沙替尼（無水）2,2,4Trimethyl1,3pentanediol,97%50G通用試劑

達沙替尼（無水）（標準品）Docetaxel,99%25MG通用試劑