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DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-22 12:34:12瀏覽次數(shù):352

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant DNA Methyltransferase 3A (DNMT3A)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:艱難梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)馬秋波病毒PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)幽門螺桿菌PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)瘧原蟲PCR檢測(cè)試劑盒(PCR 熔解曲線法)艱難梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒節(jié)瘤擬桿菌PCR檢測(cè)試劑盒結(jié)核分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒解脲脲原體PCR檢測(cè)試劑盒

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant DNA Methyltransferase 3A (DNMT3A)

DNMT3A2; M.HsaIIIA; DNA methyltransferase HsaIIIA

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量:35.7kDa

實(shí)際分子量:38kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽:Ile634~Val912 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):8.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:

2',3'-環(huán)核苷suan3'-磷suan二酯mei(CNP)重組蛋白英文名稱:Recombina 2',3'-Cyclic Nucleotide 3'-Phosphodiesterase (CNP)α1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移mei(a4GALT)重組蛋白英文名稱:Recombina Alpha-1,4-Galactosyltransferase (a4

圖片6.png


標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測(cè)和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。

KAP15.1產(chǎn)品名稱: 角蛋白相關(guān)蛋白15.1抗體交叉反應(yīng): Human

Propionyl-Histone H4 (Lys16)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來(lái)源: Mouse

phospho-GABBR2 (Ser892)產(chǎn)品名稱: GB型受體2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow

GPR142產(chǎn)品名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR142蛋白抗體交叉反應(yīng): Human

EIF2S1產(chǎn)品名稱: EIF2S1單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Galectin 8產(chǎn)品名稱: 半乳糖凝集su8抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

CAPNS1產(chǎn)品名稱: CAPNS1單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

C11ORF67產(chǎn)品名稱: 11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

應(yīng)用類型: Other英文名稱: CBX4英文別名: CBX 4; CBX4_HUMAN; E3 SUMO-protein ligase CBX4; EC:2.3.2.-; Chromobox protein homolog 4; Polycomb 2 homolog (Pc2; hPc2); Pc2; hPc2;

C7orf34產(chǎn)品名稱: 7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體交叉反應(yīng): Human
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3A(DNMT3A)重組蛋白人假尿苷suan合mei10(PUS10)ELISA試劑盒PUS10假尿苷suan合mei10elisa檢測(cè)試劑盒Human Pseudouridylate Synthase 10(PUS10)ELISA Kit

人假尿苷suan合mei1(PUS1)ELISA試劑盒PUS1假尿苷suan合mei1elisa kitHuman Pseudouridylate Synthase 1(PUS1)ELISA Kit

人鉀中間小電導(dǎo)鈣激活通道蛋白亞家族N成員2(KCNN2)ELISA試劑盒KCNN2鉀中間小電導(dǎo)鈣激活通道蛋白亞家族N成員2ELISA試劑盒Human Potassium Intermediate Small Conductance Calcium Activated Channel Subfamily N, Member 2(KCNN2)ELISA Kit

人鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(KCC4)ELISA試劑盒KCC4鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Potassium Chloride Cotransporters 4(KCC4)ELISA Kit

人鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(KCC3)ELISA試劑盒KCC3鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3elisa檢測(cè)試劑盒Human Potassium Chloride Cotransporters 3(KCC3)ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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