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神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-21 18:49:35瀏覽次數(shù):196

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS
物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:變形絲囊霉菌探針法熒光定量PCR試劑盒Aphanomyces astaci變異變形桿菌PCR檢測試劑盒Proteus mirabilisPCR變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Proteus mirabilis變異鏈球菌PCR檢測試劑盒Streptococcus mutansPCR變異變形桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒彭氏變形菌探針法熒

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1)

NOS; nNOS; IHPS1; NC-NOS; N-NOS; bNOS; Neuronal NOS; Constitutive NOS; NOS type I; Nitric Ocide Synthase; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase NOS1

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

代謝通路

神經(jīng)科學(xué)

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測分子量:24.2kDa

實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ile1199~Ile1399 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):8.5

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

特點(diǎn):

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human ITGB3宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human Secretogranin V宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human CHURC1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Chicken IL-1b宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Chicken

圖片6.png



標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試,條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測

  誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。

ADRB3產(chǎn)品名稱: β3腎上su能受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit

C11ORF16產(chǎn)品名稱: 11號(hào)染色體開放閱讀框16抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Annexin A13產(chǎn)品名稱: 膜粘連蛋白13抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit

C10orf27產(chǎn)品名稱: 0號(hào)染色體開放閱讀框27抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

應(yīng)用類型: Other英文名稱: MUC2英文別名: MLP; SMUC; Intestinal mucin 2; MUC 2; Mucin 2; Mucin 2 intestinal; Mucin 2 intestinal/tracheal; Mucin 2 oligomeric mucus/gel forming; Mucin 2 precursor; Mucin 2 tracheal; Mucin like protein; Mucin2; Intestinal mucin-2; MUC-2; Muc2; MUC2_HUMAN; Mucin-2; Mucin2.

DMT1產(chǎn)品名稱: 金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow

DCX/Doublecortin產(chǎn)品名稱: 雙皮質(zhì)su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

MAP1LC3A產(chǎn)品名稱: 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

45201產(chǎn)品名稱: 陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

COX6B2產(chǎn)品名稱: 細(xì)氧化mei蛋白6B2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Sheep
神經(jīng)型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白人磷suanmeiPP2A癌性抑制物(CIP2A)ELISA試劑盒CIP2A磷suanmeiPP2A癌性抑制物elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human cancerous inhibitor of PP2A,CIP2A ELISA Kit

人磷suan激mei1(PGK1)ELISA試劑盒PGK1磷suan激mei1elisa檢測試劑盒Human phosphoglycerate kinase 1,PGK1 ELISA kit

人磷suan化乙酰輔meiA(PaCoA)ELISA試劑盒PaCoA磷suan化乙酰輔meiAelisa kitHuman Phosphorylated acetyl CoA,PaCoA ELISA Kit

人磷suan化糖原合mei激mei3β(pGSK3B)ELISA試劑盒pGSK3B磷suan化糖原合mei激mei3βELISA試劑盒 Human phosphorylated glycogen synthase kinase 3 beta (pGSK3B) ELISA kit

人磷suan化肌球蛋白輕鏈(PMLC)ELISA試劑盒PMLC磷suan化肌球蛋白輕鏈elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Phosphorylated Myosin Light Chain,PMLC ELISA Kit
操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作


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