產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrog |
種屬 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-22 10:37:54瀏覽次數(shù):260
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrog |
種屬 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:支鏈α-酮酸脫氫酶(BCKDK)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK)
BCKDHKIN; 3-Methyl-2-Oxobutanoate Dehydrogenase/Lipoamide Kinase,Mitochondrial
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌 預測分子量:24.5kDa 實際分子量:24kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Arg44~Thr223 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點:9.0 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Mouse HMGB1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Mouse
Recombinant Human SHIP2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human CXCR7宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human GAPDHS宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測
誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標記方法。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。
ProSAPiP1產(chǎn)品名稱: 含脯氨suan突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
OR52W1產(chǎn)品名稱: 嗅覺受體52W1抗體交叉反應: Human
GNAT2產(chǎn)品名稱: G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
KIAA1755產(chǎn)品名稱: KIAA1755蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
HSD3B7產(chǎn)品名稱: 滋養(yǎng)層細胞抗原3β7抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit
FIGNL1產(chǎn)品名稱: FIGNL1蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Sheep
USE1產(chǎn)品名稱: 囊泡轉(zhuǎn)運蛋白Use1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
TMEM66產(chǎn)品名稱: 跨膜蛋白66抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
Granulin產(chǎn)品名稱: 顆粒蛋白前體抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
DRES17產(chǎn)品名稱: 乳相關(guān)蛋白DRES17抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
支鏈α-酮酸脫氫酶(BCKDK)重組蛋白人絲氨suan蛋白mei2(PRSS2)ELISA試劑盒PRSS2絲氨suan蛋白mei2ELISA試劑盒Human Protease, Serine 2(PRSS2)ELISA Kit
人絲氨suan蛋白mei12(PRSS12)ELISA試劑盒PRSS12絲氨suan蛋白mei12elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Protease, Serine 12(PRSS12)ELISA Kit
人絲氨suan/蘇氨suan激mei4(STK4)ELISA試劑盒STK4絲氨suan/蘇氨suan激mei4elisa檢測試劑盒Human Serine/Threonine Kinase 4(STK4)ELISA Kit
人絲氨suan/蘇氨suan激mei39(STK39)ELISA試劑盒STK39絲氨suan/蘇氨suan激mei39elisa kitHuman Serine/Threonine Kinase 39(STK39)ELISA Kit
人絲氨suan/蘇氨suan激mei3(STK3)ELISA試劑盒STK3絲氨suan/蘇氨suan激mei3ELISA試劑盒Human Serine/Threonine Kinase 3(STK3)ELISA Kit