詳細介紹
產品名稱:小鼠皮下結締組織細胞;A9
規格:1×10?cells/T25培養瓶
貨號:YS-02X9527
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養基;優質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
phospho-c-Jun (Thr93) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌基因c-Jun抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rabbit dog IgG 兔抗狗IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規格: 1mg
糖皮質誘導壞死因子受體抗體 GITR 0.1ml
Rabbit Bovine IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗IgM 0.1ml
FNIP1 英文名稱: 卵泡刺結合蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SIRT1(Ser47) 磷酸化沉默調節蛋白1抗體 規格 0.1ml
Rabbit dog IgG 兔抗狗IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規格: 1mg
Natrexone/BSA:Natrexone/KLH 納曲酮偶聯血清白蛋白:納曲酮偶聯血藍蛋白Multi-class antibodies規格: 0.5mg
Activated protein C 活化蛋白C抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-BAD(Ser128) 磷酸化相關死亡促進因子抗體 規格 0.1ml
兔抗山羊 IgG(H+L)/FITC 0.1ml 綠色熒光,公司分裝
VAMP3 英文名稱: 囊泡相關膜蛋白3抗體 0.2ml
DLL1 英文名稱: Notch信號通路Delta樣配體1抗體 0.1ml
Activated protein C 活化蛋白C抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
SSX2 英文名稱: 滑膜肉瘤X染色體相關2抗體 0.1ml
FBXO36 英文名稱: FBXO36 F-box蛋白相關蛋白36抗體 0.2ml
DNA拓普西異構酶Ⅱ抗體 DNA TPⅡα 0.2ml
t-PA/FITC 熒光素標記組織型纖溶酶原激活劑抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-JAK2(Tyr1007+Tyr1008) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體 規格 0.1ml
PP-2A (protein phosphatase 2A) 蛋白質磷酸酶-2A(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
小鼠皮下結締組織細胞;A9二甲亞砜(>99.0%(GC))甲基丁香酚組織組蛋白脫乙酰化酶(HDAC)總活性比色法定量檢測試劑盒
N,N-二甲酰(>99.5%(GC))香葉組蛋白脫乙酰化酶1(HDAC1)活性比色法定量檢測試劑盒
甲酸乙酯(>98.0%(GC))鬼臼素組蛋白脫乙酰化酶1(HDAC1)活性比色法定量檢測試劑盒
甲酸甲酯(>98.0%(GC))D-半乳糖酸組織組蛋白脫乙酰化酶1(HDAC1)活性比色法定量檢測試劑盒
庚烷(>99.0%(GC)]千金藤素組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量檢測試劑盒
己烷(>96.0%(GC)]異亮氨酸組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量檢測試劑盒
異(>99.5%(GC)苯甲組織組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量檢測試劑盒
甲(>99.8%(GC)卡維丁組蛋白脫乙酰化酶3(HDAC3)活性比色法定量檢測試劑盒
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。