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加溶金屬蛋白酶1(MP1)重組蛋白

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更新時間:2023-03-22 10:58:31瀏覽次數(shù):249

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Pitrilysin Metalloproteinase 1 (MP1)
物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
加溶金屬蛋白酶1(MP1)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:呼吸道細菌多重PCR檢測試劑盒胡桃PCR檢測試劑盒花生PCR檢測試劑盒壞死梭桿菌PCR檢測試劑盒狐貍源性成分(Vulpes)核suan檢測試劑盒鯊魚源性成分(Shark)核suan檢測試劑盒火雞源性成分 (Turkey)核suan檢測試劑盒鴨源性成分Co基因(Duck-Co)檢測試劑盒

詳細介紹

圖片6.png


公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:加溶金屬蛋白酶1(MP1)重組蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Pitrilysin Metalloproteinase 1 (MP1)

PITRM1; hMP1; PreP; PreP Peptidasome; Presequence protease, mitochondrial; Metalloprotease 1

酶與激酶

代謝通路

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::分泌

預(yù)測分子量:30.7kDa

實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Leu544~Ser806 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:5.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human ERBIN宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human NDUFS7宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human RCVRN宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Mouse EGF宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Mouse

標(biāo)簽選擇:

親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

  誘導(dǎo)表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM。混勻備用(PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點:

標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。

熒光標(biāo)記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

CYLD產(chǎn)品名稱: 微管結(jié)合蛋白CYLD單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

BCAR1產(chǎn)品名稱: 乳抗雌激su耐藥蛋白1交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Rabbit

SERPINB4產(chǎn)品名稱: 絲氨suan蛋白mei劑B4/鱗狀細胞抗原2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit

SH3BGR產(chǎn)品名稱: SH3BGR蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit

MRPS7產(chǎn)品名稱: 線粒體核糖體蛋白S7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Sheep

Robo4產(chǎn)品名稱: 腫內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白Robo4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

phospho-BRAF (Thr597)產(chǎn)品名稱: B-Raf抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

LIME產(chǎn)品名稱: LCK相互作用膜蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse

Phospho-EGFR (Ser1045), AF405 conjugated產(chǎn)品名稱: AF405標(biāo)記的表皮生長因子受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse

LAP1產(chǎn)品名稱: 層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
加溶金屬蛋白酶1(MP1)重組蛋白人溶質(zhì)載體家族3成員2(SLC3A2)ELISA試劑盒SLC3A2溶質(zhì)載體家族3成員2elisa檢測試劑盒Human Solute Carrier Family 3, Member 2(SLC3A2)ELISA Kit

人溶質(zhì)載體家族39成員6(SLC39A6)ELISA試劑盒SLC39A6溶質(zhì)載體家族39成員6elisa kitHuman Solute Carrier Family 39, Member 6(SLC39A6)ELISA Kit

人溶質(zhì)載體家族30成員8(SLC30A8)ELISA試劑盒SLC30A8溶質(zhì)載體家族30成員8ELISA試劑盒Human Solute Carrier Family 30 Member 8(SLC30A8)ELISA Kit

人溶質(zhì)載體家族26成員4(SLC26A4)ELISA試劑盒SLC26A4溶質(zhì)載體家族26成員4elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Solute Carrier Family 26, Member 4(SLC26A4)ELISA Kit

人溶質(zhì)載體家族1成員5(SLC1A5)ELISA試劑盒SLC1A5溶質(zhì)載體家族1成員5elisa檢測試劑盒Human Solute Carrier Family 1, Member 5(SLC1A5)ELISA Kit


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