神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-BE公司正在銷售的產(chǎn)品：金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體Anti-CD5L/Api6/FITC 熒光素標(biāo)記CD5L抗體IgG
抑癌蛋白DKK1抗體Anti-CD6/TP120/FITC 熒光素標(biāo)記CD6抗體IgG
膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DISPA抗體Anti-CD7/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD7抗體IgG
DIRAS2蛋白抗體Anti-CD8/FITC 熒光素標(biāo)記CD8蛋白抗體IgG

產(chǎn)品名稱：神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-BE

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9947

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

FOXM1/HFH 11 peptide 插頭蛋白M1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CD27 CD27 / TNFRSF7 兔單抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-DNA PK/PRKDC(Thr2609) 磷酸化DNA依賴性蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

自顯影X膠片(蛋白印跡用) 3"×5" Kodak

Zinc finger protein 754 英文名稱： 鋅指蛋白754抗體 0.1ml

DHX15 英文名稱： DHX15蛋白抗體 0.2ml

CD27 CD27 / TNFRSF7 兔單抗 (PE) Human

HSL(hormone-sensitive lipase) 敏感脂肪酸(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CD177/NB1 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAP2B 磷脂酸磷酸酶2b抗體 規(guī)格 0.1ml

CPA2 Kit Human 人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 ELISA配對抗體 ELISA

TAK1 英文名稱： 轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶1 0.1ml

C1orf195 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框195抗體 0.2ml

 CD177/NB1 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  human IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗人IgG 0.3ml

FRG2B 英文名稱： FRG2B蛋白抗體 0.2ml

DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體  Dnmt3a 0.1ml

 PDE4D/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸二酯酶4D抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-TRADD(Ser269) 磷酸化壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  Dog IgG/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;SK-N-BEHISTONE H3蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次人天門冬轉(zhuǎn)氨酶/谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT/GPT）ELISA試劑盒, GOT/GPT ELISA k

細(xì)胞NF KAPPA B P65蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒10/20次人6酮前列腺素F1a（6-keto-PGF1a）ELISA試劑盒,6-keto-PGF1a ELI

石蠟切片組織CASPASE-5蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次人脂肪分化相關(guān)蛋白（ADRP）ELISA試劑盒,ADRP ELISA

載玻片細(xì)胞CASPASE-5蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次人胱天蛋白酶12（Casp-12）ELISA試劑盒,Casp-12 ELISA

凍切片組織CASPASE-5蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白（α-SCA）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織CASPASE-5蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒10/20次人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子（TWEAK）ELISA試劑盒,

細(xì)胞CASPASE-5蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒10/50 次人β內(nèi)啡肽（β-EP）ELISA試劑盒,

細(xì)胞CASPASE-5蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒10/50 次小鼠血小板因子3（PF-3）ELISA試劑盒,

CASPASE-5蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒5次小鼠腫瘤壞死因子β（TNF-β）ELISA試劑盒,

CASPASE-5蛋白共沉淀分析試劑盒5次大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2（BACE2）ELISA試劑盒,

CASPASE-5蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次大鼠組織因子（TF）ELISA試劑盒,

細(xì)胞CASPASE-6蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試劑盒10/20次大鼠促腎上腺皮質(zhì)素（ACTH）ELISA試劑盒,

載玻片細(xì)胞CASPASE-6蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次豬熱休克蛋白20（HSP-20）ELISA試劑盒,

凍切片組織CASPASE-6蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次鴨γ干擾素（IFN-γ）ELISA試劑盒,

石蠟切片組織CASPASE-6蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次庚型肝炎病IgM（HGV-IgM）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。