化工儀器網
產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Glycyl tRNA Synthetase (GARS) |
| 種屬 | Homo sapiens (Human，人) | 規格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細介紹
蛋白表達及純化：
1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
公司產品僅供科研使用，不得用于臨床！
產品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
甘氨酰tRNA合成酶(GARS)重組蛋白 | Recombinant Glycyl tRNA Synthetase (GARS) | Homo sapiens (Human，人) |
商品介紹：
CMT2D; CMT2-D; DSMAV; GlyRS; SMAD1; EJ; Charcot-Marie-Tooth Neuropathy 2D; Glycine tRNA Ligase; Diadenosine tetraphosphate synthetase; AP-4-A synthetase 酶與激酶 物種：Homo sapiens (Human，人) 來源：原核表達 宿主E.coli 內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位：：線粒體, 細胞質 預測分子量：22.7kDa 實際分子量：23kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽：Val567~Glu735 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點：5.1 應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關產品：
Recombinant Human PSMD9宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human GRIA4宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human MCCC2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human ZEB2宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養細胞蛋白提取
1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；
2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。
4、本產品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
CD11a產品名稱: 整合suαL抗體產品別名: Integrin αL; Integrin-αL; Integrin-α-L; Integrin α L;
Klotho產品名稱: Klotho多肽蛋白抗體產品別名: 克老su
BPTF產品名稱: 胎兒阿茲海默抗原/核小體重塑因子抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig
FUBP3產品名稱: FUBP3單克隆抗體交叉反應: Human
ADAM2產品名稱: 去整合su樣金屬蛋白mei2抗體交叉反應: Human
MAPKAP1/SIN1產品名稱: 絲裂原活化蛋白激mei相關蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
BTN2A1產品名稱: 嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體交叉反應: Human
RAD51AP2產品名稱: RAD51AP2蛋白抗體交叉反應: Human, Dog, Horse, Rabbit
GALNT12產品名稱: 多肽N-乙酰氨基半乳糖轉移mei12抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, Rabbit
ADCY3產品名稱: 苷suan環化mei3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
甘氨酰tRNA合成酶(GARS)重組蛋白人15-epi-氧脂su A4(15-epi-LXA4)ELISA試劑盒15-epi-LXA415-epi-氧脂su A4ELISA試劑盒Human 15-epi-Lipoxin A4,15-epi-LXA4 ELISA Kit
人14-3-3蛋白(14-3-3 pro)ELISA試劑盒14-3-3 pro14-3-3蛋白elisamei聯免疫試劑盒Human 14-3-3 Protein ELISA Kit
人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)ELISA試劑盒YWHAB14-3-3 蛋白 beta/alphaelisa檢測試劑盒Human YWHAB ELISA kit
人12-脂氧化mei/脂加氧mei(LOX-12)ELISA試劑盒LOX-1212-脂氧化mei/脂加氧meielisa kitHuman 12-lipoxygenase,LOX-12 ELISA Kit
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒1,5-AG1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨elisamei聯免疫試劑盒Human 1,5-anhydroglucitol,1,5-AG ELISA Kit
化工儀器網