牛腎細(xì)胞;MDBK公司正在銷售的產(chǎn)品：銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Anti-PRL 泌乳素抗體
濃縮素2復(fù)合亞基D3抗體Anti-PRL1/PTP4A1 肝再生磷酸酯酶1抗體
磷酸化分裂周期蛋白6抗體Anti-PRL2/PTP4A2 肝再生磷酸酯酶2抗體
磷酸化周期素依賴酶2抗體Anti-PRL3/PTP4A3 磷酸酯酶3蛋白抗體

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：牛腎細(xì)胞;MDBK

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號：YS-02X9662

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

PEPT1/FITC 熒光素標(biāo)記腸道肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1/小肽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  mouse IgG/Gold 金標(biāo)記羊抗小鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml

雌受體β 抗體  ER-β 0.2ml

Rabbit  Goat IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml

Phospho-FAK (Tyr407) 英文名稱： 磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser214) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  mouse IgG/Gold 金標(biāo)記羊抗小鼠IgG(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml

VEGF-A(Vascuoar endothelial growth factor A) 血管內(nèi)皮生長因子A抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 Caspase-7 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PCK1 磷酸烯醇丙酮酸羧激酶抗體 規(guī)格 0.2ml

MCAM Kit Human 人 CD146 / MCAM / MUC18 ELISA配對抗體 ELISA

TPTE 英文名稱： /抗原44抗體 0.2ml

CSNK1G1 英文名稱： 酪蛋白激酶1γ1抗體 0.2ml

 Caspase-7 半胱胺酸蛋白酶蛋白-7抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

SLC27A6 英文名稱： 脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體 0.1ml

FASTKD1 英文名稱： Fas活化激酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml

巨噬細(xì)胞炎癥因子1α抗體  MIP-1α 0.1ml

 S100-A9/MRP14/CFAG/FITC 熒光素標(biāo)記鈣結(jié)合蛋白S100A9抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PDPK1(Tyr373/376) 磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Cygb (cytoglobin) 細(xì)胞球蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
牛腎細(xì)胞;MDBK酸性橙74L-酪氨酸Gresshoff & Doy*培養(yǎng)基

二甲酚橙溶酶小球菌底物Linsmaier & Skoog基礎(chǔ)培養(yǎng)基

煌橙,藏花橙G Q10Linsmaier & Skoog*培養(yǎng)基

靛紅（吲哚醌）牛膽鹽Nitsch基礎(chǔ)培養(yǎng)基

新銅試劑(雙環(huán)己酮草酰二腙)磷酸轉(zhuǎn)乙酰化酶Nitsch*培養(yǎng)基

奈比洛爾鹽酸鹽;奈必洛爾乙酰磷酸二鋰鹽Schenk & Hildebrandt基礎(chǔ)培養(yǎng)基

奈必洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)胰蛋白酶Schenk & Hildebrandt*培養(yǎng)基

核固紅蛋白低分子量標(biāo)準(zhǔn)（SDS法）White基礎(chǔ)培養(yǎng)基