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詳細介紹
蛋白表達及純化：
1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
公司產品僅供科研使用，不得用于臨床！
產品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
N-酰基鞘氨醇酰胺水解酶2(ASAH2)重組蛋白 | Recombinant N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2) | Homo sapiens (Human，人) |
商品介紹：
HNAC1; non-lysosomal ceramidase; Neutral ceramidase 酶與激酶 物種：Homo sapiens (Human，人) 來源：原核表達 宿主E.coli 內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位：：細胞膜, 分泌, 高爾基體 預測分子量：50.4kDa 實際分子量：21&40&56kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽：Ala451~Ile780 with Two N-terminal Tags, His-tag and SUMO-tag 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點：6.7 應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關產品：
巖藻糖-1-磷suan鳥苷酰轉移mei(FPGT)重組蛋白英文名稱：Recombina Fucose-1-Phosp二磷酸肌醇戊基磷酸激酶1(PPIP5K1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Diphosphoinositol Pentakisphosphate Kinase 1 (PPIP5K1)Homo sapiens (Human，人)
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養細胞蛋白提取
1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；
2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。
4、本產品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
NAGLU產品名稱: N-乙酰基-α葡萄糖苷mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep
Endothelial lipase產品名稱: 內皮脂肪mei單克隆抗體交叉反應: Human
DIAPH1產品名稱: 常染色體顯性遺傳相關蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Dog, Horse, Rabbit
Factor VII heavy chain產品名稱: 凝因子7抗體交叉反應: Human
AVPR1A產品名稱: 抗利尿激su1A抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Rabbit
NMT1產品名稱: 豆蔻酰基轉移mei1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
RERG產品名稱: Ras相關雌激su調節生長蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Rabbit, Sheep
PRR24產品名稱: 富含脯氨suan蛋白24抗體交叉反應: Human
45019產品名稱: 凋亡相關蛋白3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse
MPRIP產品名稱: MPRIP蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse, GuineaPig
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