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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS) |
| 物種 | Homo sapiens (Human，人) | 規格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細介紹
公司產品僅供科研使用，不得用于臨床！
產品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
前列腺素I合酶(PTGIS)重組蛋白 | Recombinant Prostaglandin I Synthase (PTGIS) | Homo sapiens (Human，人) |
商品介紹：
PGIS; CYP8A1; Prostacyclin Synthase; Prostacycline Synthetase; Prostagladin I2 Synthetase; PGI2 Synthetase; Cytochrome P450,Family 8,Subfamily A,Polypeptide 1 酶與激酶 代謝通路 心腦血管 激素代謝 物種：Homo sapiens (Human，人) 來源：原核表達 宿主E.coli 內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位：：內質網腔 預測分子量：60.8kDa 實際分子量：61kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽：Met1~Pro500 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 95% 等電點：6.8 應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化：
1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
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注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現空間障礙。分子間交聯形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續操作。
4、本產品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養細胞蛋白提取
1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；
2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
CENPL產品名稱: 著絲粒蛋白L抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
MDR1產品名稱: 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體產品別名: P糖蛋白
IL10RB產品名稱: 白細胞介su-10受體β抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
CD9產品名稱: CD9蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
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應用類型: Other英文名稱: Cytokeratin 14英文別名: Cytokeratin 14; CK 14; Cytokeratin14; Cytokeratin-14; Dowling Meara; ebs3; Epidermolysis bullosa simplex; k14; Keratin 14; Keratin type I cytoskeletal 14; Keratin14; Koebner; Krt 14; krt14; EBS3; EBS4; NFJ; Keratin, type I cytoskeletal 14; K1C14_HUMAN.
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